1)为什么以ATP作为生物污染的指标？
ATP是活细胞的特征。ATP高能磷酸键水解所释放的能量驱动许多细胞的反应。

2)如何用萤火虫荧光素酶测定ATP？
在氧和ATP的参与下，荧光素酶催化荧光素转化为氧化荧光素，并产生一个光子。除ATP外
测定系统含所有的试剂。通过检测光信号，可精确地测定胞外ATP的量。其它组分的量过量，故光的释放和ATP的量成正比。

3)ATP检测系统的可重复度如何？
不同货号的rL/L试剂，及用不同的荧光检测仪会使结果有所不同。试剂温度的改变也会带来读数的改变。试剂和样品的保存也对测试结果有影响。为此测试必须包括必要的正和负对照。

4)用荧光素酶测定ATP有没有特殊要求？
由于检测系统对ATP非常敏感，操作者必须避免使试剂和样品污染外源ATP。这些污染源包括：
微生物污染、指纹中来源于皮肤细胞的ATP、比色皿、加样器、制备和测量样品的实验器皿、荧光检测仪探头。因此测试必需包括负对照。负对照的光值应小于预设背景值。太高的背景光读数表明试剂或设备被污染。

5)如何保存未用的rL/L和ATP？
将1管rL/L重组溶液加入1管rL/L中，轻轻倒置，使用前在室温中平衡1小时。经平衡后，rL/L试剂可在室温（25 ℃）保存1天，也可在4℃保存4天。保存5天以上时，平衡1小时后，需立即在-20 ℃冷冻。不能多次冷冻已在-20 ℃和4℃保存的重组rL/L溶剂。重组rL/L溶液对冻融次数敏感，冻融次数不能超过3次。注意：应将重组rL/L溶液的保存在小的聚丙烯管中，可避免多次冻融，缩短解冻时间和平衡所用时间。冻过的rL/L溶液的温度不应超过25 ℃，解冻后应充分混匀。

6)检测生物污染，ATP检测系统较普通微生物检测系统有些什么优点？
ATP检测系统的主要优点是快。几分钟就可获得ATP测试结果。如测试表明存在污染，可及时清洗测试区域，再取样品测试清洗效果。普通微生物捕板检测细菌需要48小时，检测酵母和真菌需7天。这两种技术可同使用：用ATP检测系统检测污染，用微生物检测系统鉴定污染物和污染源。

7)rL/L试剂的稳定如何？
重组rL/L溶液的活力在4℃保存1天后下降10%，2天后下降15%。冻融后活力也会下降，应分装试剂使用。

8)检测区域的面积是多大？
大约为10cmX10cm。

9)测试前样品在测试液中能保存多长的时间？
在4℃保存4小时（或在冰上），样品稳定不影响读数。测试前需平衡到室温。如保存在室温，应在60分钟内作测试，超过这个时间，ATP量会因微生物的生长而增加。作为HACCP程序的一部分，操作者应注意延迟时间，不会影响测试结果。

10)在加入抽提液后，样品能保存多久？
能保留15分钟不影响测试结果。

11)加入rL/L试剂后，荧光信号的稳定如何？
加入rL/L试剂后，应立即测荧光信号。每次测试时，加入rL/L试剂后，测荧光信号的间隔应一致。ENLITEN？/sup试剂经优化以准确测定ATP，不利于长期光释放。

12)是否需配套用特定的荧光检测仪？
测试系统可和普通荧光检测仪配套。应用荧光检测仪制造商推荐的管子。不同荧光检测仪对定量的荧光信号的测定读数不同。因次，应测定所用荧光检测仪的零对照值。