二、检测原理：
MYCOFAST ABG 试剂盒是通过在不同浓度的抗生素的存在下支原体的生长是否受到抑制来检测其对抗生素的敏感性。支原体是否生长可由培养基是否发生颜色变化来判定。解脲脲原体和人型支原体在生长过程中分别水解尿素和精氨酸产生氨而使培养基变碱，从而使培养基由桔黄色变为紫红色。在做药敏试验之前应先将标本接种于选择培养基并预培养以使支原体数在104－105之间。

三、试剂盒组成：
* M.C.M. 1: 2.2ml肉汤培养基瓶，含β内酰胺类抗生素，用于复溶M.C.M. 2培养基。
* M.C.M. 2: 冻干培养基瓶，含有支原体生长所必须的生长因子（马血清、酵母提取物等）及β内酰胺类抗生素、尿素、精氨酸、酚红。
* Select. U.u.: U.u. 冻干选择培养基瓶，可促进U.u.的生长。使用前先用2 ml无菌水复溶。
* Select. M.h.: M.h. 冻干选择培养基瓶，可促进M.h.的生长。使用前先用2 ml无菌水复溶。
* MYCOFAST ABG 检测板：每块板由两排反应条组成，每排含10个反应孔。

孔1（C＋）：生长对照孔孔2－20含以下不同浓度的9种抗生素：
孔2（TE）：四环素（4ug/ml）
孔3（TE）：四环素（8ug/ml）
孔4（TE）：四环素（16ug/ml）
孔5（DO）：强力霉素（4ug/ml）
孔6（DO）：强力霉素（8ug/ml）
孔7（MNO）：米诺环素（4ug/ml）
孔8（MNO）：米诺环素（8ug/ml）
孔9（JM）：交沙霉素（2 ug/ml）
孔10（JM）：交沙霉素（8 ug/ml）
孔11（E）：红霉素（1 ug/ml）
孔12（E）：红霉素（4 ug/ml）
孔13（E）：红霉素（8 ug/ml）
孔14（L）：林可霉素（2 ug/ml）
孔15（L）：林可霉素（8 ug/ml）
孔16（PT）：原始霉素（2 ug/ml）
孔17（OFX）：氧氟沙星（1 ug/ml）
孔18（OFX）：氧氟沙星（4 ug/ml）
孔19（PEF）：甲氟哌酸（1 ug/ml）
孔20（PEF）：甲氟哌酸（4 ug/ml）

四、注意：
本试剂盒仅用于体外诊断。标本及接种后的试剂都存在潜在传染的可能，因此操作时必须小心，废弃物应根据有关的传染物品处理规定进行处理。

五、标本的采集与处理：
标本在做药敏试验时，必须选用A3培养基或U.M.M.培养基接种。标本接种于A3培养基后于2-8℃保存至支原体的鉴定计数结束。标本接种于U.M.M.培养基后于2-8℃保存至MYCOFAST结果判定。支原体培养结果阳性的A3培养基或U.M.M.培养基在做抗生素的敏感性试验之前，必须取出与室温平衡。

六、试剂的保存：
未开启的试剂可于2-8℃保存至盒上所示有效期。

七、试验所需试剂和材料（试剂盒内未提供）：
灭菌过的移液器
石蜡油（#99003）
恒温箱（35-37C）
废液缸

八、操作步骤：
将2-8℃保存的已接种标本的培养基（A3或U.M.M.）（阳性标本）和试剂取出与室温平衡。

1、预培养：按以下步骤进行：
1．1 根据支原体的种类选取一瓶Select.U.u. 或Select.M.h. 并用2ml 无菌水复溶。混匀。
1．2 从A3或U.M.M.培养基中取出200ul加入Select.U.u. 或Select.M.h.选择培养基。
1．3 35-37℃培养16-18小时。

2、检测板的接种：
向M.C.M.2中加入2.2 ml M.C.M.1 肉汤培养基。
向M.C.M.培养基中加入20ul已接种的选择培养基。
充分混匀。
揭开检测板的粘纸并接种： 每孔加入100ul已接种的M.C.M培养基。
每孔加入2滴石蜡油。 重新盖上粘纸。

3、培养：
将检测板置于35-37℃培养48小时（即使对照孔24小时内就出现阳性结果）。
有些标本在48小时内才出现耐药结果。

九、结果判断及说明：
判读结果之前必须观察反应孔内液体是否清澈，并检查对照孔颜色是否由桔黄色变为紫红色。

结果判断：支原体的生长可使培养基由桔黄色变为紫红色，若无支原体生长，则培养基为黄色。

说明：检测板必须培养48小时后判定结果。支原体对抗生素是敏感、中度敏感或耐药主要依据是看该孔内的抗生素是否抑制了支原体的生长。

敏感：同一种抗生素，两种不同浓度的对应孔支原体的生长都受到抑制。
中度敏感：同一种抗生素，浓度低的孔内可观察到支原体的生长，浓度高的孔内支原体的生长受到抑制。

耐药：同一种抗生素，两种不同浓度的对应孔都观察到支原体的生长。

注意事项：
1．对于四环素和红霉素,可根据前两种浓度来判定支原体对其是敏感、中度敏感或耐药。最后一个浓度是用来判定支原体对抗生素的高度耐药。
2．在红霉素的药敏试验中，可能由于培养基PH的原因，会出现几种不同的结果。添加一个或多个高于4ug/ml浓度的红霉素有助于结果的判定。
3．对于原始霉素，只用一种浓度即可判定支原体对其是敏感或耐药。