重庆医科大学检验系  罗春丽

　　膀胱肿瘤（Bladder Carcinoma BC）是男性泌尿生殖系统最为常见的肿瘤，发病率有逐年增加的趋势。国内BC发病率在男性泌尿生殖系统中占首位，具有较高的复发率。BC的早期诊断是提高疗效的关键，多少年来膀胱检查一直是诊断BC的重要手段，但毕竟属于创伤性检查不能发现早期病变。尿液膀胱瘤标志物检查是否能成为敏感、特异的非侵入性的诊断方法，人们进行了大量的探索，现归纳如下。

1   端粒酶（Telomerase）

　　端粒是真核细胞染色体末端的一段特殊的DNA结构，在细胞分裂时，该区的端粒酶能复制40-200个碱基对的DNA序列，随着每个细胞的分裂，体细胞的端粒进行性缩短，停止分化并衰老，端粒酶失活。正常体细胞内端粒酶无活性可测及，在恶性肿瘤细胞的无限增殖中端粒酶被激活以维持肿瘤细胞不断合成DNA。Yoshida等应用分子物学技术PCR首次探讨了尿脱落细胞端粒酶活性对诊断BC的临床应用价值，结果发现26例BC患者中有16例尿液检测出端粒酶活性（灵敏度62%），83例非癌性尿液标本仅3例前列腺增生患者端粒酶阳性，余为阴性（特异性96.4%）。王翔等用PCR为基础改良的端粒重复片段扩增（TRAP）银染法检测BC患者尿液和膀胱冲洗液脱落细菌中端粒酶活性，阳性率分别为83.3%(40/48)和87.5%(42/48),20例对照组(泌尿道良性疾病)3例显示较弱的端粒酶活性,因此对于BC的早期诊断,尤其是低分化的BC,它可能成为一个特异的尿液膀胱肿瘤标志物,对术后肿瘤复发的监测也具有意义。

2   透明质酸酶（Hhaluronidase）

　　透明质酸酶是一种细胞外降解基质透明质酸的内生性糖甙酶，在胚胎发育、血管形成、免疫监视以及肿瘤发生发展过程中起着重要作用，BC相关的透明质酸酶活性与其它透明质酸酶是有区别的，它的最适pH为4.3。Henri等用酶作用物（HA）凝胶技术及ELISA法检测了对照组和BC组尿中透明质酸酶水平，其中G2/G3级（9/40）尿中透明质酸酶为33±4.5mu/mg,是对照组4.2±1.2mu/mg的5-8倍,G1级(22例)为6.5±1.7mu/mg。尿透明质酸酶测定提示G2/G3级的BC敏感性自我批评异性分别为100%和88%，因此检测 尿透明质酸酶，对于高级BC诊断是一个简便、非侵入性的、特异的、敏感的方法。

3   细胞核基质蛋白22（NMP22）

　　细胞核基质蛋白（Nuclear Matrix Protein, NMP）是构成细胞核的非染色体结构，部分NMP已被证实作为某些肿瘤的特异性标志物，其中NMP22认为是尿液BC的标志物。Craig Zippe等用酶免疫试剂盒检测了18例病理证实为BC和312例膀胱非肿瘤性疾病，结果恶性肿瘤组NMP22中位数为31.6u/ml(95%可信限13.4-90.9)，非膀胱肿瘤组中位数为4.3u/ml(95%可信限3.8-4.8)，两组<0.001。如果以尿内10 u/ml为阳性，NMP22敏感性和特异性分别为100%和85%，与脱落细胞相比敏感性、特异性有所提高。Markes等研究发现NMP22对肿瘤复发监测有意义，在125例BC术后被病理证实复发的33例，其中23例（70%）尿中NMP22高于参考值10 u/ml，在72例尿NMP22低于参考值10 u/ml患者中，62例（86%）在随后膀胱镜检查证实无肿瘤复发，研究表明NMP22是一个有价值的检测BC的标志物。

4   血管内皮生长因子（VEGF）

　　血管内皮生长因子（Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF）常与肝素结合，它是由二硫链连接的糖蛋白二聚体，分子量约为46KD，不同种属VEGF的N端氨基酸序列相似但不完全相同。研究表明VEGF在肿瘤细胞中合成，含有VEGF的肿瘤细胞生长更迅速 ，因此许多肿瘤包括BC都有VEGF的高表达，而抗VEGF抗体则能抑制肿瘤的生长和浸润。Jeremy等用ELISA法检测了261例患者尿中的VEGF含量，结果发现经膀胱镜检查证实为BC的153例患者尿VEGF含量较108例泌尿生殖系其它恶性肿瘤（P<0.001）和良性疾患（P= 0.004）高。首次被细胞学证实为BC的16例和肿瘤复发的137例，尿VEGF检测的敏感性和特异性分别为75%和62%，83%和48%。BC早期诊断复发的阳性与阴性预测值分别为59%和81%，73%和71%。研究结果证实BC患者尿内VEGF含量增高与肿瘤发生与复发有关，可望成为一个BC早期诊断监测复发的有价值的尿液肿瘤标志物。

5   细胞角蛋白20（CK20）

　　细胞角蛋白（Cytokeratin CK）是分布于上皮细胞的中间的骨架成分，它包括至少20个成员，CK20是其中之一，Moll等1990年分离鉴定并作了组织分化等方面的研究，发现CK20在胃肠道上皮、BC患者尿路上皮有表达，正常尿路上皮不表达。Klein等用PT-PCR方法测定了BC患者尿CK20表达发现此法敏感性、特异性分别为91%和67%，对照组无假阳性。Hamden等用免疫细胞化学的方法连续测定了58例BC患者，其中10例CK20表达正常，在以后随访，时间中位数为18（范围13-28）个月，无1例有肿瘤复发。在41例BC患者中30例（73%）显示CK20异常表达，以后随访有肿瘤复发，时间中位数为6（范围2-24）个月。CK20能否成为有价值的尿液肿瘤标志物还需要大量临床研究进一步加以证实。
尿液肿瘤标志物是一项无创伤性的检测手段，用于BC早期诊断、监测复发以及判断预后是十分重要的。寻找敏感、特异的标志物同时应对现已发现的众多标志物进行大量的临床论证，多元分析综合评价，筛选出有价值的标志物，淘汰无价值的标志物，在此基础上，建立一个最佳的多元分析组合模式，才能使这一领域的研究能够真正走向临床应用。

摘自：《中国检验医学与临床》2000年6月第1卷第2期