中日友好医院检验科  湛玉良  井新辉  友好医院临床医学研究所  李静

　　基质效应（matrix effect）对临床化学分析的影响越来越受到人们的重视。最早是在酶动力测定中用人工制备的参考物质时发现的。在酶法分析及免疫化学分析中普遍存在基质效应影响定量测定准确性的问题，从20世纪70年代开始尤其80年代末90年代初，国外许多专家学者致力于此方面的研究，探讨更多的是血脂和脂蛋白测定中基质效应问题。CHO测定已建立相当成熟的参考系统，有利于其基质效应的研究。我们在临床工作中发现采用血清校准液和水溶性标准液，对于测定结果有较大的影响，给临床诊断带来不便，尤其是尿肌酐。我们就此问题开展了一些工作，现将结果报道如下：

　1   材料与方法
1.1  研究对象  本院门诊80份尿标本，本院门诊及住院病人100份血清标本。
1.2  主要试剂  BUN、UA、TG、CHO试剂购自上海科华一东菱诊断用品有限公司；TP、ALB、CR试剂购自北京中生生物工程高技术公司；CA购自上海长征医学科学有限公司。
标准液：血清多项校准液购自德国宝灵曼公司（Cfas）和贝克曼公司。
水溶性标准液CHO、TG购自上海科华；其余购自日本第一化学株式会社。
1.3  仪器  日立7170全自动生化分析仪。
1.4  方法
1.4.1  分别采用水溶性标准液和血清校准液标准仪器，测定100份血清BUN、UA、TG、GLU、CHO、TP、ALB、CR、CA值及80份尿样品CR、CA值（各自测定方法同试剂说明书）然后对两种标准下的结果进行t检验。
1.4.2  尿样品40份作50倍稀释，所得肌酐结果与稀释前的结果进行统计学处理（标准液采用水溶性标准液）。
1.4.3  万分之一分析天平准确称量纯CR1.888mg和77.59mg用蒸馏水定溶100ml,以两种标准液定标测其值,比较准确度。
1.4.4  血肌酐回收试验：血清500µl+肌酐标准液50µl(10mg/dl)分别用不同校准液校准仪器测定肌酐。
1.4.5  尿肌酐回收试验：尿液250µl+肌酐标准液25µl（77.598mg/dl）分别用不同校准液校准仪器测定肌酐。

　2   结果  见表1~表6

　3   讨论 
　　按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)文件，基质效应的定义指：①标本中除分析物以外的其它成分对分析物测定值的影响；②基质对分析方法准确测定分析物的能力的干扰。广义地来讲基质效应也应包括已知的干扰物（如CHO测定中胆红素、血红蛋白、抗坏血酸等都是干扰物），但目前只将基质效应限于生物材料中未知或未定性的物质或因素（如黏度、pH等）基质效应所致分析结果的偏差称为基质偏差（matrix bias），并对基质偏差的准确度进行了评价。
　　临床实验室或试剂生产厂家制备的标准液通常是经过处理的混和人血清或类似物，本实验中所用的血液标准液就是模拟人血清成分的。水溶性标准液相比于血清校准液的分析系统，后者的反应更接近于新鲜人血清（临床标本）。通过本实验结果部分可以发现在血清样品测定时，运用此两种标准液定标后，结果存在非常显著的差异。此差异即标准液基质效应所致的基质偏差。虽然血清校准液在制备过程中经过过滤、透析或离子交换、添加剂等预处理后，其基质与新鲜人血清基质也略有差异，但相比于水溶性基质更令人满意。
　　尿肌酐的测定对于临床尤其是肾内科的诊断具有重要的价值。但目前尿液生化分析中，因尿液难以保存而没有生产厂家制备尿样品专用的标准液和质控物，只是采用与血清样品相同的标准液和质控物。在本实验中，尿样品用两 种标准液定标后，肌酐的测定结果之间都存在非常显著的差异(P<0.05)，此差异可能是标准液基质所致。我们认为水溶性标准液接近尿基质，但这两者之间是否差异很小而易于接受呢？为此我们取了40份尿样品作50倍稀释，使其基质基本达到与水溶性标准液差异很小，结果发现稀释前后肌酐测定结果未见显著性差异（P<0.05）。说明尿液基质与水溶性基质基本一致。进而我们还用水溶解纯肌酐得到定值浓度，分别在两种标准液定标下测其浓度。从表4结果可以看出水溶性标准液下的测定值更易于接受，水溶性标准基质与尿基质存在的差异在临床上意义不大。在血清样品测定中，用水溶性标准液和血清多项校准液测定结果差异不明显，不影响临床判断。
　　基质效应对测定结果影响可通过回收试验加以确定。尿肌酐回收试验结果以水溶性标准最佳。血肌酐回收试验采用贝克曼多项血标准、Cfas空白校正和水溶性标准结果均较好。Cfas多项血清标准回收试验结果较差，这可能由于Cfas校准液是黄疸血清，胆红素干扰肌酐测定。因此在血肌酐测定中，用Cfas多项校准液校准仪器时，必须用样品空白补偿方式，以补偿胆红素对测定结果的影响。
综上可见，基质效应在血清样品和尿样品化学分析中均存在，对测定值有较大影响。为了避免此问题，我们建议：首先，在血清样品测定中最好采用未加工处理及冻干的血清，并减少加入外源成分来作为标准液和质控物。其次，尿样品在未寻找到更好标准液前，采用水溶性标准液而不要采用血清校准液。另外，Natio(1993)提出减少基质效应的研究方向，至今仍有参考价值：①改进室内质控样品，使其更接近新鲜人血清；②改进仪器设计及试剂组成；③选择方法及方法学参数，使其适应性更强且易于掌握，对制备物（如标准液，室间质控样品与质控物）基质的确切性不敏感。

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　摘自：《陕西医学检验》2002年2月第17卷第1期