血液分析仪校准规范化的建议

中华医学会检验分会血液学、体液学专家委员会

 血液分析仪是临床实验室最常用的分析仪器之一，其检测结果是否准确对疾病的诊断和治疗监测有直接的影响。在仪器检测结果精密度良好的前提下，仪器校准是保证检测结果准确的关键步骤，为此结合国内的实际情况，在参考有关文献的基础上，就血液分析仪校准的基本要求提出如下建议。
    一、血液分析仪校准的一般要求
   (一)为了保证检测结果的准确性，要求对每一台血液分析仪进行校准。仪器安装时必须由厂家进行校准并提供校准记录，否则不能用于临床标本的检测。
   (二)实验室需按“建议”的要求建立适合本实验室使用的血液分析仪校准程序并写成文件。内容包括：使用校准物的溯源性、来源、名称及其保存方法；校准的具体方法和步骤；何时要求进行校准、由何人负责实施等。
   (三)血液分析仪进行校准后，必须开展室内质量控制以监测仪器的检测结果是否发生漂移。
   二、校准物
   (一)校准物的来源
   1．来自本仪器的配套校准物。
   2．来自新鲜人血，但定值要求直接或间接地溯源至国际标准。
   (二)新鲜血作为校准物的定值
   1．直接溯源至国际标准的定值方法：可使用血细胞分析的参考方法定值，但要建立参考方法的难度较大，在临床实验室难以实施。
   2．间接溯源至国际标准的定值方法：取新鲜血用二级标准检测系统*或规范操作的检测系统**对其进行定值，用定值的新鲜血作为常规校准物。要求在8小时内(温度条件为18C—25℃)完成定值及仪器的校准。
   *二级标准检测系统：直接溯源至参考方法；具备较完善的质量保证措施；与国外具有权威性的参考实验室定期进行比对的检测系统。
   **规范操作的检测系统：使用配套试剂；用配套校准物定期进行仪器校准；规范地开展室内质量控制；参加室间质量评价成绩优良；人员经过培训。
   (三)校准物的选择
   使用中国药品监督管理局注册登记的国际公认质量可靠的检测系统的实验室，可使用制造商规定的配套校准物，也可使用新鲜血作为校准物。对于使用无配套校准物检测系统的实验室，必须使用新鲜血进行仪器校准。
 三、校准方法
 对于使用中国药品监督管理局注册登记的国际公认质量可靠的检测系统的实验室，在使用制造商规定的配套校准物时，严格按仪器说明书规定的程序进行校准。使用其他检测系统的实验室可用新鲜血按如下方法进行仪器校准。
 (一)仪器的准备
 先用清洁剂对仪器内部各通道及测试室处理30分钟。确认仪器的背景计数、精密度及携带污染在说明书规定的范围内时，才可进行校准，否则须查找原因，必要时请维修人员进行检修。
  (二)校准物的准备
   1．使用制造商提供的配套校准物时①将校准物从冰箱内(2—8C)取出后，要求在室温(18~25℃)条件下放置15分钟，使其温度恢复至室温。②检查校准物是否超出效期，是否有变质或污染。③轻轻地将校准物反复颠倒混匀，并置于两手掌间慢慢搓动，使校准物充分混匀。④打开瓶塞时，应垫上纱布或软纸，使溅出的血液被吸收。⑤将两瓶校准物合在一起，混匀后再分装于2个瓶内。
   2．使用新鲜血作为校准物时①用EDTA·K2为抗凝剂的真空采血管取健康人新鲜血10ml，每ml血需抗凝剂的浓度为1.5~2.2mg。要求新鲜血的Hb、WBC、RBC、Hct和Plt检测结果在参考范围内。将新鲜血混匀后分装于3个管内，每管的血量为3ml。②取其中1管，用二级标准检测系统或规范操作的检测系统连续检测11次，计算第2~11次检测结果的均值，以此均值为新鲜血的定值。③其他2管新鲜血作为定值的校准物，用于仪器的校准。
 (三)对校准物进行检测
 1．取1瓶校准物，连续检测11次，第1次检测结果不用，以防止携带污染。
 2．仪器若无自动校准的功能，则将第2—11次的各项检测结果用手工记录在工作表格中，计算出均值，均值的小数点后数字保留位数较日常报告结果多一位。有自动校准功能的仪器可直接得出均值。
   (四)用上述均值与校准物的定值比较以判别是否需要调整仪器
   1．计算各参数的均值与定值相差的百分数(不计正负号)，计算公式：(均值—定值)／定值×100％，与表1中的标准进行比较。
2．各参数均值与定值的差异全部等于或小于表中的第一列数值时，仪器不需进行调整，记录检测数据即可；若各参数均值与定值的差异大于表中的第二列数值时，需请维修人员核查原因并进行处理；若各参数均值与定值的差异在表中第一列与第二列数值之间时，需对仪器进行调整，调整方法可按说明书的要求进行。若仪器无自动校准功能，则将定值除以所测均值，求出校准系数，将仪器原来的系数乘以校准系数即为校准后的系数，将校准后的系数输人仪器更换原来的系数。
　

表1  仪器校准的判别标准

 (五)校准结果的验证
将第2管未用的校准物充分混匀，在仪器上重复检测11次，去除第1次结果，计算第2—11次检测结果的均值，再次与表中的数值对照。如各参数的差异全部等于或小于第一列数值，证明校准合格。如达不到要求，须请维修人员进行检修。
   四、在以下几种情况下需对仪器进行校准
   血液分析仪在投人使用前；更换部件进行维修后，可能对检测结果的准确性有影响时；室内质量控制显示系统的检测结果有漂移时(排除仪器故障和试剂的影响因素后)；对于开展常规检测的实验室，要求半年至少进行一次校准。
   五、对其他有关设备的校准
   所有对血液分析仪检测结果的准确性有影响的实验设备，在投入使用时都要定期进行校准。如稀释器、天平、温度计、湿度计等。