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细胞因子的检测
发布时间02年12月17日 15时35分
 

  

 一、什么是细胞因子(cytokine)?

    细胞因子是一类激素,其分子量在15—35kd左右,由了细胞或其它淋巴细胞,单核细胞等产生,在免疫系统细胞间起互相联系的介导作用。

    目前最重要的细胞因子包括干扰素,白细胞介素家庭,肿瘤坏死因子等.

二、如何检测细胞因子?

    几年以前,大部分检测是通过生物方法,因此法耗时,使用困难,难以标准化,缺乏特异性,所以目前和可预见的将来,Elisa法将是最佳选择,因为这恰好可以克服以上缺点,而且,对于血清或血浆中的天然因子来说不存在失活的问题,所以ELISA法在检测这部分标本时将显示无比的优越性。实际上。国际上生物法已仅限于在药厂出质检报告时使用,ELISA技术发展至今已有20多年历史,形成了一整套完善的理论与实验方案,并且已得到很好的普及。

三、为何要测细胞因子?

    因为当今大部分疾病都与免疫学相关,因此研究免疫系统细胞作用方式及其相互联系是非常重要的,而细胞因子在免疫系统中的中心地位已得到公认,例如:

    1.在AIDS病人中测量细胞因子进一步了解病人的免疫状态对了解病情,掌握病程,确定治疗的效果是极有用的,因此美国AIDS临床试验计划(Aids Clinicatrial Group)要求所有实验室在试用抗AIDC药物时检测TNF一α1

    2.类风湿关节炎研究已清楚地表明TNF一α,IL—lβ和IL-6水平在此类病人中有明显的相关性,类风湿性关节炎SIL-2R水平明显增加,这一结果有助于类风湿性关节炎的诊断和疗效的判定,因此许多国外有抗风湿类药物因子试剂盒检测其效果。

    3.肝炎是我国最严重的传统病,研究表明INF—n在肝炎中起重要作用,目前IL-2,干扰素等重组类药物已广泛用于肝炎的治疗,各类细胞因子的检测在确定用药(因为它们很昂贵),追踪疗效,探查更深层的发病机理等方面将有非常广阔的前景。肝病血清SIL-2R水平明显高于正常人,且乙肝患者中CAH的SIL-2R明显高于CPH;丙肝患者中急性肝炎的SIL-2R明显高于慢性肝炎,乙肝患者血清HBV DNA阳性组SIL-2R水平显著高于阴性组,认为检测血清SIL-2R水平可作为思考病情变化和预后判断的监测指标,具有一定实用价值。

    乙肝后肝硬化思者血清SIL-2R水平均高于正常,其水平高低与乙肝的活动程度呈平行关系,并与HBV的急性感染血清标志关系密切,经治疗急性HBV感染者SIL-2R水平较其他组下降快。说明乙肝患者SIL-2R检测对其疗效和预后判断有价值。
   各类丙型肝炎的SIL-2R均明显增加,各肝病患者SIL-2R水平与肝损害程度相一
致,阿米巴样肝脓肿患者血清SIL-2R水平显著高于正常对照组,PCH(原发性肝癌),肺癌病人外周血SIL-2R水平明显高于正常人,对急性肝炎患者测血清SIL-2R含量,可作为观察病情变化,治疗效果及判断项后的一项指标。

    肝病病人血清中IL-2及淋巴细胞分泌IL-2的能力↓,提示肝硬化,慢活肝及急性肝炎患者的细胞免疫功能低下。

   慢性肝炎(CH)患者IL-6,INF一α水平最高,恢复期或稳定期TNF一α和IL-6水平
低于急性期或活动期,提示IL-6和丁NF一α是肝脏损害重要的炎症介质。

    恶性阻塞黄疽患者SIL-2R含量增加,与良性阻塞性黄疽组相比较,有显著性差异,这可能是恶性阻塞性黄疽患者极易发生感染的重要原因。

    4.新生儿感染常可夺去初生的生命,及时治疗是唯一办法,大量研究发现IL-6是已知最早出现的感染指标,比常规的C一反应蛋白要提前很多,因此国际上在新生儿室以 IL-6代替CRP作为早期感染指标已有越来越普及的趋势。

    5.IL-4可诱导IgE产生及细胞表面IgEFc受体(CD23)表达,与变态反应性疾病关系密切,因此国际上正在研究用IL-4桔抗剂治疗此类疾病。

   6.IL-8与类风湿关节炎,各种纤维化疾病,肝炎及其它许多炎症反应密切相关,这也是首个发现的化学因子(chemokine)。

   7.急性脑血管病(ACVD)患者急性期血清INFα和SIL-2Ra水平明显高于正常对照
组,恢复期血清INF和SIL-2Ra浓度较急性期均有不同程度下降,但与正常对照组仍有显著差异。

   脑梗塞思者急性期和恢复期周围血IL-1,IL-6活性及TNF水平较对照组明显增
加,急性期又较恢复期高。癫痫(EP)血清SIL-2R水平显著增加。急性心肌梗塞(AMI)病人的血清SIL-2R水平明显高于正常,可作为判断AMI病情严重程度和预后的指标之一。

    AMI血清IL-6浓度明显高于正常,IL-6浓度在AMl3天时达高峰,以后逐渐呈下
降趋势,至1月时仍高于正常,表明IL-6在AMI的病理过程中有意义。

   8.皮肤病患者血清SIL-2R均有不同程度改变,阳性率最高的为皮肤恶性肿瘤。带状疱疹患者急性期SIL-2R显著高于正常组,但IL—l无明显变化,银屑病患者SIL-2R增加,尖锐湿疣患者IL-2水平较低。

   9.血液病患者血清SIL-2R增高与机体免疫异常及病情严重程度相关。

   Al(急性白血病)SIL-2R水平的明显升高,化疗CR后血清SIL-2R水平明显下降,
除ALL外可降至正常水平,通过本实验观察认为,测定AL患者SIL-2R水平,可以监测点者病程及治病效果,并且作为预后判断的重要指标。

   ALL患儿不论初发或复发,其血清SIL-2R及TNF均明显增高,ALL合并CNSF时SIL-2R和 TNF均升高,且出现在CSF常规检查等改变之前,揭示CSF中SIL-2R及TNF的检测可能有助于CNSL的早期诊断及疗效判定,急变期,加速期和慢性CML患者血清SIL-2R含量明显增高。

   MM患者血清IL-2含量明显增高,血清IL-2>5mg/l的思者,3年存活率明显高于
血IL-2<5mg/l的患者;血清IL-2>5mg/l的所有患者,其血清β2-MG<6mg/l,并依据此二项指标将MM患者分成3组,结果血清IL-2增高而β2-MG无明显升高的思者预后最好,血清IL-2不高但β2-MG升高的患者项后最差。认为,检测血清IL-2的水平,能估计MM患者的存活期,血清IL-2的增高可作为MM思者预后良好的指标。

   SLE患者血清SIL-2R、IL-2、IL-6和IL-8水平显著高于健康人,且血清IL-8与
IL-6浓度呈显著性正有关,揭示SLE存在免疫细胞活化,异常增高的细胞因子引起免疫紊乱和促发免疫损伤,血清细胞因子的变化有助于监测狼疮活动。ITP患者IL-2活性显著低于对照:反复下呼吸道感染的患儿血清SIL-2R升高。川畸病儿急性期IL-6明显升高。

    10.随着甲状腺水平的升高或降低,SIL-2R水平呈相似变化趋势,可作为甲状腺疾病诊治监测的又一有用指标。

    ll.各组进展期癌症患者外周血IL-2,IL-6活性显著降低,而IL-2R水平却显著增高,各组癌症之间上述各项指标比较均无显著差异,手术后1个月时各组癌症患者外周血IL-2,TL-6活性有所恢复。IL-2R水平有所下降,但仍低于正常人群,结果揭示,癌症患者外周血T细胞功能被严重抑制,这种变化与疾病的病情发展和治疗有关。肺癌患者单个核细胞产生IL-2能力增高。

   肝癌、肺癌、乳腺癌患者干扰素水平显著↓。鼻咽癌患者急性期、口腔额面部恶性肿瘤患者血清SIL-2R水平显著↑。膀胱癌患者血清SIL-2R显著高于正常人,与肿瘤分期与预后有关。

   总之,在当代医学中,细胞因子在肿瘤,感染,自身免疫炎症反应,血液病,伤口愈合,胚胎发生等方面均起重要作用,目前的工作仅仅是开端,更多的机理,相互影响和毒创作用等等还有待于深入研究,其中人们将开发出极有前途的新药,一些疑难绝症的攻克也许就在其中。这一切,都离不开一个好的检测方法。

   我科近期开展白介素2(IL-2),白介素2受体(SIL-2R),白介素6(IL一6),Y干扰素(IFN—Y)4项。

   其意义如下:

   IL-2:对于自身免疫病,肿瘤、传染病及移植排斥反应等病程的监测具有重要意义。是急性反应蛋白。

   IL-2R:作为了细胞参与的一系列病理状态的标记,如肿瘤移植排斥反应,传染病,糖尿病等。对病程的监测具有重要意义。

   IL-6:是已知最早出现的感染指标,比常规的CRP要提前很多,可采用检测IL-6来观察病人,尤其是新生儿感染。

   IFN—Y:具有抗肿瘤和免疫调节作用。

    除IL-2、IL-2R、IL-6、IFN一Y外的细胞因子,如白介素 l—17,若需测定,请与骨髓室及时联系。

   样本要求:

   抽静脉血3ml,抽血后尽快送骨髓室分离标本,标末每天接收。

   报告时间:

   根据标本数量定期报告,约l一2周,随着标本数量增多报告时间可缩短。

摘自:《检验与临床》

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