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体积分数对酶实验结果的影响
发布时间02年12月25日 11时46分
 

   北京复兴医院检验科 俞嘉华
 

    生化分析仪知识启蒙者、著名临床生化专家文庆成先生在其“生化自动分析仪的参数设置与质量保证”著作中提到酶实验的体积分数对酶测定结果有影响,并特别提到在CK实验中体积分数对实验结果有明显影响。临床检验杂志2000年第4期上刊登的一篇文章也提到体积分数对酶测定结果有影响。但我们在长期实践工作中却始终未发现这一现象,根据我们编写的实验参数,测定常用酶,体积分数对酶实验结果没有影响。以CK 为例,我们做了如下实验:编写4个CK的实验参数,延迟期为3.33分钟,测定期为6.25分钟,其他设置点数值均相同,区别就是体积分数不同。4个实验的试剂量均为200微升,样品体积分别为4、6、8、10微升,体积分数分别为0.0196 0.029 0.0384 0.0476,即在所谓的敏感区内。所用试剂为奥斯帮公司液体试剂,样品为罗氏公司低值(157IU/L)和高值(471 IU/L)质控血清。每份样品均做双份测定,结果可以说是完全一致:低值为 152.5、 150.5 、153 、153 IU/L,高值样品为 452 、453.5 、456.5 、449.5 IU/L,最后一份可能还是因为重复性的缘故。我们也曾使用过中生、郎道、长征等其他公司的试剂做过实验,结果也未发现体积分数对酶测定结果有影响。
    
    之所以出现不同的实验结果,我们认为主要是因为酶实验参数设置中线性期终点(底物耗尽)确定不一致导致。我们认为,对每种试剂都应结合本单位所用生化仪具体条件,对试剂做实际的动力学观察,对底物耗尽点的判断应当从严掌握。在我国酶实验的室间允许变异系数为8%左右,那么对底物耗尽点的判断就不应当超过此限。我们对所有酶实验的线性期结束点都以线性衰减4%为限,此点吸光度与空白吸光度相减即为试剂可用吸光度范围,用它可以计算其他有关参数设置点数值。原则上我们应当遵守体积分数的约定值,但体积分数对酶测定结果不会有太大影响,这也是事实,如果你的仪器躁声很低,减少样品量提高测量上限也是可以的。
 
    生化分析仪的参数应当由仪器主控人员自编而不是来源于其他途径,生化分析仪的实验参数正确与否是生化分析仪安全运行的关键。开放式生化分析仪带有两重性,在增加仪器的灵活适用性的同时也增加了出错的风险。酶实验参数除了基本计算公式外,更重要的是要保证进入仪器的全部试剂样品产生的信号受到监控并使之无一疏漏。酶实验参数表中各个参数设置点之间有着严格的数学推导关系,相互协调衔接,构成一个安全屏障圈,只有做到这一点,你的生化分析仪运行才是令人放心的。

摘自:检验医学信息网

 
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