金宽  
  

    与疫苗和药物相比，特异性检测技术在SARS科研中，开发速度最快，投入临床最早。从4月下旬开始，两种抗体检测试剂盒通过国家为加速非典防治开通的“绿色审批通道”，进入临床，各地也相继涌现了一批用于辅助临床诊断的检测技术，SARS早期诊断似乎伸手可及。
　　
    但是，事实却没有这样乐观。直到今天，SARS诊断仍然没有摆脱主要依靠流行病学史和临床症状的局面，特异性的诊断方法还没有真正在SARS防治中发挥主要作用。这究竟是怎么一回事？
　　 
    目的不同检测手段不同最先获准的检测方法是“慢郎中”
　　
     据专家介绍，通常有三种检测方法可以确诊有害微生物对人的感染。第一种是通过细胞培养，从人的血液、血清、分泌液、尿液、粪便等标本中直接培养分离出细菌或病毒。第二种检测方法是检测人体各种标本中细菌或病毒的核酸，这种方法叫做多聚酶链式反应，简称PCR。而针对RNA病毒检测的方法，则称作逆转录多聚酶链式反应，简称RT－PCR。第三种检测方法是检测患者感染细菌或病毒后产生的抗体，通过检测到的特异性抗体来查找患者是被什么细菌或病毒感染的。这三种检测方法在原理上都是成熟的，因此，在SARS的防治工作中，检测技术取得进展，要比疫苗和药物研究上的困难相对少。
　　
     专家指出，在三种检测技术中，细胞培养对实验室条件和操作人员的经验水平都有很高的要求。这种方法的试验时间长，对细菌或病毒的分离阳性率不高，阴性结果不能作为临床排除诊断的依据。不过这种方法对治疗控制一种疾病的意义非常重大，如研制疫苗、病理学研究都以细胞培养为基础工作，而在直接的临床诊断上意义不大。
　　
    曾通过“绿色通道”直接进入临床试验的那两种诊断试剂盒是怎么回事？
　　
     专家指出，这两种试剂都采用了抗体检测原理。“它的作用主要是核实判断临床诊断是否正确，以及在防治上了解疾病流行后人群的免疫水平。”专家指出，“这种检测方法特异性好，无论荧光检测还是酶联检测准确率高，检测速度也快，但是，这种检测技术无法在早期临床诊断上发挥作用。因为人在感染病原后不能很快产生抗体，如SARS患者产生IgM抗体最快也要10天以后，产生IgG抗体起码要15天到20天，而且SARS病毒在人体中与免疫系统相互作用，使产生抗体的规律还不太清楚，是不是所有的SARS患者在感染病毒后三周都能产生抗体还有待进一步研究。”这就是说，现在法律允许可以在临床实验的检测工具，相对于早期发现SARS病人而言，只是一个“慢郎中”。
　　
     能够在早期临床检测中及时发现SARS患者的方法是RT－PCR。但是，专家说，目前这种检测方法要应用到临床还需要完善。
　　
     RT－PCR检测SARS病毒核酸还须摸索最佳样品、最佳采样时间
　　
    在中国疾病预防控制中心传染病预防控制所的P3实验室内，一台叫做病毒载量仪的仪器设备正通过96份SARS患者标本，对目前几种尚未申报国家批准文号的RT－PCR试剂盒进行检测。
　　
     研究人员阚飙说，从理论上讲，人只要感染了SARS，采用逆转录多聚酶链式反应RT－PCR方法，就能马上通过检测标本中SARS病毒的核酸发现。他们现在正在做的就是测试RT－PCR检测试剂盒的质量，同时也进行临床诊断的核实。
　　
     这种检测，结果是以线性方式表现出来的。96个样品每个都在坐标上显示出一条线，纵轴表示荧光的强度，横轴表示在哪个扩增循环上核酸达到了需要量。这些线有的明显成为弧度很大的曲线，有的基本平行。随着鼠标的选择，计算机逐个显示每一条线的形状。阚飙告诉记者，有很大曲线的就是阳性样品，基本平行的线条的就说明没有找到SARS病毒的核酸。现在阳性和阴性的检测结果在比例上相差不多，排除诊断失误的因素，说明目前的RT－PCR检测还有问题需要解决。

    一方面RT－PCR试剂盒在特异性、敏感型、试剂规范上还需要提高，另一方面在病人标本的采集上也需要摸索，如要在病人感染后的什么时间采标本，采什么的标本最适合表达SARS病毒的核酸等。
　　
     那么这些摸索怎样进行，主要在哪些方面下功夫？阚飙说，改进的方面主要是，检测物的纯化、相关试剂的选择、方法本身的优化、试剂的质量以及缓冲液和试剂的浓度等。目前他们通过实验，对采样的时间和采样的内容初步掌握了规律。
 
      检测原理是成熟的，SARS则是全新的早期临床检测技术肯定能找到
　　
     SARS与人类的遭遇战考验着医学科学工作者。尽管目前在检测方法的进展方面，效果还不尽如人意，但是能在如此短的时间内拿出特异性的检测手段已属不易。一些医院检验科的同志这样评价目前的SARS检测技术方法。
　　
     301医院检验科主任从玉隆说，现在还有一个关于法理的问题，对SARS的检测，在完善和提高检测技术的特异性、敏感性的同时，必须对已经基本成熟的检测试剂盒加快申报国家批准文号的步伐。否则，一些检测就不能在临床诊断上使用，这也妨碍SARS检测水平的进一步提高。
　　
     卫生部科教司司长祁国明在接受记者采访时对我国SARS诊断技术水平的提高充满信心。他说，虽然面对一种新的疾病，要马上把所有问题都解决好是不现实的，但是，我们无疑已经取得了阶段性的进展。检测学的原理是成熟的，方法也都是被证明非常有效的。面对SARS的早期诊断，目前国家的科研部门和一些省级疾病防治单位都在积极投入力量，世界卫生组织也公布了用RT－PCR检测SARS的7对引物，这对完善早期检测方法有很大帮助。除了对通常的三种检测方法继续深入研究外，还有一些SARS患者的临床检测指标在诊断上的参考价值，也引起了重视。这些研究通过国家的组织和协调，会较快产生效果。因此，如果将来再次发生SARS疫情时，我们肯定能够掌握早期临床检测SARS的技术。

摘自：健康报