陈苏红 张敏丽 牟航 管伟 王升启 目的 建立一种快速、准确、特异定量检测炭疽杆菌的方法。
方法 根据复合探针荧光定量分析原理,已炭疽杆菌染色体rpoB基因为靶序列,设计合成引物和探针,对炭疽杆菌进行实时定量聚合酶链反应(PCR)检测,并探讨荧光探针与淬灭探针用量及比例、镁离子浓度、淬灭探针长度对定量结果的影响。
结果 本法最适条件:荧光探针浓度300nmol/L、荧光探针与淬灭探针的比例为1/2,镁离子浓度为3300nmol/L,淬灭探针长15个核苷酸,该法检测炭疽杆菌的灵敏度达103拷贝,能特异区分炭疽杆菌与其他蜡样杆菌。
结论 复合探针荧光定量PCR技术能够快速准确、特异、敏感地对炭疽杆菌进行定量分析,可为临床诊断提供帮助。 摘自:《中华检验医学杂志》2003,26,2 !-- content_end> |