韩聚强 胡大荣 胡学玲 孙殿兴 范公忍 刘超英 吴忆贫 目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)作为肝靶向性基因治疗载体的可能性. 方法:用外源报告基因绿色荧光蛋白(GFP)取代HBV S基因读码框构建重组HBV载体,通过脂质体转染HepG2细胞,荧光显微镜下观察外源基因的表达,半巢式聚合酶链反应(PCR)检测细胞核内HBV 共价闭合环状DNA构型,常规PCR和Southern杂交检测上清液重组病毒DNA. 结果:携带外源基因GFP的重组HBV载体能够在肝细胞内表达外源蛋白,此重组载体为复制缺损型,单独转染后不能在肝细胞包装与复制,在缺失包装信号ε的辅助HBV质粒下可被包装成携带外源基因的成熟重组HBV颗粒并分泌到胞外. 结论:HBV可被改造成肝靶向性基因治疗载体. 摘自:中华肝胆病杂志2003 Vol.11 No.6 !--> |