北京解放军总医院临检科 乐家新 丛玉隆 兰亚婷
网织红细胞(以下简称网红)计数是判断骨髓红系造血情况和疗效观察的重要指标。其检测方法既有传统的显微镜目测法,又有现代化的仪器计数法(如流式细胞仪,Sysmex R系列网红计数仪及血细胞分析仪)。Bayer ADVIA 120是我国近年来引进的具有网红检测功能的全自动细胞分析仪,该仪器采用激光技术在约50秒内可同时进行全血细胞计数(CBC)、白细胞分类、网红计数及分群、网织红细胞内血红蛋白含量测定等,一次测量可为临床提供近40项实验参数。不仅极大地提高了工作效率,而且改善了计数结果的精密度和准确性,为了探讨网织红细胞系列参数的临床应用价值,我们用ADVIA 120对健康成年人的网织红计数及分群等网织红细胞参数进行了检测,并检测缺铁性贫血、肿瘤化疗等部分临床病例,现将结果报告如下: 第一部分 网织红细胞计数及分群的正常参考值调查 一、 材料与方法
1. 仪器与试剂:德国拜耳公司生产的ADVIA 120全自动细胞分析义、原装配套试剂、高、中、低三种浓度的全血质控物及高、低两种浓度的网红质控物。
2. 检测对象:从接受健康体验的教师、职工、大专院校学生、军人及农民中,筛选符合下列条件者作为健康人群:主要脏器无症状及体征,肝、肾功能等生化指标正常;近期未服用影响血细胞参数的药物,血细胞常规检查各项参数及细胞分布图形正常(其中Hb:男性>135g/L,女性>120g/L)。健康成年人655例,年龄19~60:其中男性342例,女性313例。
3. 质量控制:仪器安装后已经过严格校正及性能鉴定,其准确度、精密度、线性和稳定性等指标均符合仪器使用说明书的规定。每次使用前,仪器先预热30分钟,然后测定三种全血质控物及两种网红质控物进行室内质控,两次测定结果均在允许范围内时方可检测待测标本。
4. 检测方法:受检者早晨空腹,从肘静脉抽血1ml加入到含EDTA-2K 1.5~2.0mg的抗凝瓶内混匀,室温放置,于采血后0.5~4h完成检测。严格按照仪器使用说明书操作,打印检测结果及细胞图形,以排除干扰因素对检测结果的影响。
5. 结果统计:将仪器打印结果按性别进行分组进行统计,分别计算出网红百分数(RET%)、网红绝对值(RET#)、低荧光强度网红百分率(LFR%)、中荧光强度网红百分率(MFR%)和高荧光强度网红百分率(HFR%)五个参数。
二、 结果
对分组的数据进行t 检验发现,男、女组的RET%及RET#结果有无明显差异,而分群参数无明显差异,故将其数据合并统计,结果见表1;作者检测的结果与文献报道的数据对比见表2。
三、 讨论
1. 表1的结果显示,网红计数及分群的正常参考值与调查人群的性别有关,RET%和RET#两个参数男性组高于女性组(p<0.05);在网红分群中,LFR%和HFR%为女性组高于男性组、而MFR%则低于男性组,但两组之间无显著性差异(p>0.05)。
2. 从表2的结果可见,由于各作者使用的检测仪器不同,调查对象的数量、年龄及分布的区域不同,文献所报道的网红计数与分群的正常参考值均在一定的差异。我们测定的网红计数与分群结果与多数作者的、报道的数据相近。1996年,我们曾用H*3型血细胞分析仪检测了64例20~30岁青壮年正常人的网红主数与分群的正常参考值。由于人数较少及年龄范围较窄,检测结果与此次大样本的数据存在一定的差异,网红计数与分群的结果(未分男女)分别为:1.00±0.41(RET%)、86.03±4.77(LFR%)、11.30±4.14(MFR%)和2.60±1.73(HFR%).年龄和性别因素与网红计数及分群的关系,在其它文献报道中的结论也不完全一致。Takubo等报道20~27的男性和女性的RET%无差别,但RET#、HFR%和MFR%的数值男性高于女性,LFR%则是女性高于男性,认为该结果与男性的激素水平及红细胞的数量有关。Tarallo等的结果显示,20~59岁成年组男性的RET#高于女性,而60岁以上的老年组和4~19 岁的人群中则无明显差别。 表1 健康人成年人网红计灵敏及分群的正常参考值(ˉX ±S) 年 龄 | 例 数 | RET(%) | RET#(×109/L) | LFR(%) | MFR(%) | HFR(%) | 19~60岁 | 男性342 | 1.45±0.43 | 71.86±2.71 | 88.06±3.41 | 9.88±2.85 | 2.06±1.44 | | 女性313 | 1.22±0.41 | 55.36±20.23 | 88.71±3.92 | 9.18±3.26 | 2.11±1.37 | 合 计 | 655 | | | 88.36±3.84 | 9.56±3.21 | 2.08±1.3.9 |
表2 健康人成年人网红计数及分数值及文献报道的数据对比(ˉX±S)
作者 使用仪器 | 年龄 (岁) | 例数 | RET (%) | RET (×109/L) | LFR (%) | MFR (%) | HFR (%) | 报告时间 (年) | 本文作者 | 19~60 | 男:342 | 1.45±0.43 | 71.86±22.71 | 88.06±3.41 | 9.88±2.85 | 2.06±1.44 | | ADVIA120 | | 女:313 | 1.22±0.41 | 55.36±20.23 | 88.71±3.92 | 9.18±3.26 | 2.11±1.37 | | Kazuhide等 R-100 | 20~40 | 123(未分 男女) | 0.70±0.55 | 43.6±19.0 | 78.80±6.50 | 18.73±5.07 | 23.3±1.95 | 1989 | Paterakis等 R-100 | 22~44 | 180分(未分男女) | 1.22±0.35 | 61.3±17.5 | 89.20±3.40 | 9.70±3.30 | 1.00±0.80 | 1933 | Archrob等 R-3000 | 成年人 | 20(未分 男女) | 1.21±0.45 | 59.8±19.3 | 88.13±4.70 | 10.29±3.69 | 1.59±1.33 | 1994 | 彭明婷等 | 20~60 | 男:242 | 1.17±0.36 | 54.5±17.7 | 86.56±3.37 | 11.85±3.37 | 1.61±1.14 | | R-300 | | 女:133 | 1.14±0.37 | 47.3±16.6 | 88.78±3.93 | 10.19±3.46 | 1.03±0.82 | 1996 | 彭黎明等 | 20~60 | 男:72 | 1.07±0.32 | 51.18±14.92 | 92.14±3.17 | 7.40±2.86 | 0.65±0.33 | | Sysmex RAM-1 | | 女:48 | 1.28±0.42 | 56.02±17.16 | 92.14±3.73 | 7.37±3.44 | 0.78±0.34 | 2001 | 李永红等 | 19~49 | 男:35 | 1.24±0.29 | | | | | 2000 | CD-3500 | | 女:32 | 1.49±0.31 | | | | | | 陈则清 | 20~40 | 男:26 | 1.82±0.56 | 90.3±29.4 | | | | 2001 | Coulter | | 女:26 | 1.75±0.59 | 7.41±24.7 | | | | |
3.结论:健康成人网红百分率及网红绝对数的参考值范围与性别有关,网红分群与性别无关;各实验室应根据自己的条件建立相应的网红计数及发群正常参考值范围。
第二部分 网红内血红蛋白含量等参数在缺铁性贫血的临床诊断价值探讨
一、材料和方法
1.仪器与试剂:德国拜耳公司生产的ADVIA 120全自动血细胞分析仪、原装配套试剂、高、中、低三种浓度的全血质控物及高、低两种浓度的网红质控物。
2.标本:236例健康查体者(男性128例,女性108例),Hb;142.9±1101g/L,经检查无其它可能导致血液细胞参数变化的疾病;血清铁蛋白及骨髓检查确诊的IDA患者78例(男性29例,女性49例),血红蛋白:84.8±11.5g/L。静脉取血3ml,将1ml注入抗凝瓶(含EDTA-K22mg)中混匀抗凝,由于ADVIA 120血液分析仪检查。另2ml注入一次性塑料管中,用于检查血清铁蛋白。
3.质量控制:仪器安装后已经过严格校正及性能鉴定,其准确度、精密度、线性和稳定性等指标均符合仪器使用说明书的规定。每次使用前,仪器先预热30分钟,然后测定三种全血质控物及两种网红质控物进行室内质控,两次测定结果均在允许范围内时方可检测待测标本。
4.检测方法: 严格按仪器操作程序进行检测,整个测试过程在标本采集后0.5~4小时内完成,每个标本平行测2次,取均值进行统计。
二、结果
1.健康人群与缺铁性贫血患者用ADVIA 120全自动血液分析仪检测所得结果对比情况见表1。
2.结果以RDWr>11.0、HDWr>31.3、CHr<28.0、CHCMr<285及CH<27.0或两种指标综合考虑作为IDA的诊断标准,其结果分别见表2。
表1 健康人群与IDA患者血细胞检测结果相比 参 数 | 正常组(n=236) | IDA组(n=78) | P值 | 均值 | 95%可信范围 | |
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