摘要：
    目的　通过对不同人群SARS冠状病毒IgG抗体（SARS CoV IgG）检测，明确该抗体对SARS的诊断意义。
    方法　采用酶联免疫法（EIA）、间接荧光法（IFA）和免疫印迹法（WB）检测抗-SARS CoV IgG。
    结果　对117例临床确诊为SARS患者的336份系列血清检测表明，SARS病人血清抗-SARS CoV IgG最早于发病后第9天阳转，其阳性率随病程延长而上升，于发病后5～９、10～14、15～19、20～24和25d以上抗-SARS CoV IgG阳性率分别为12.5%（1/8）、73.9%(17/23)、91.5%（43/47）、96.6%（57/59）和100%（198/198）。应用EIA初筛1223名非SARS人群（包括367名在SARS病房工作1个月以上的医务人员，43名在生活中与临床确诊的SARS病人有密切接触史者，以及813例未暴露于SARS CoV人群），其中28名为抗-SARS CoV IgG弱阳性（A<0.5），但用2种IFA和WB检测均为阳性，说明EIA初筛为假阳性。
    结论　应用EIA检测抗SARS CoV IgG有助于中晚期SARS病人的诊断。对EIA初筛为抗-SARS CoV IgG弱阳性的标本（A<0.5），应用其他方法如IFA和WB检测，以排除假阳性。

    严重急性呼吸综合征（severe acute respiratory syndrome,SARS）是由SARS冠状病毒（SARS CoV）引起的一种新的急性传染病。目前，SARS的病原学检查主要包括病毒分离培养、病毒核酸及抗SARS CoV抗体检测。由于病毒的分离培养和核酸检测技术相对较复杂，且阳性率较低，因此，常用酶联免疫法（EIA）和间接荧光法（IFA）检测血清中抗-SARS CoV IgG和IgM作为SARS CoV感染的血清学诊断。由于目前抗SARS CoV IgM试剂盒尚不够成熟，因此，本研究采用EIA对不同人群血清抗-SARS CoV IgG进行了检测，旨在了解该抗体在人群中的分布情况，明确其在SARS诊断中的意义。

材料和方法

    标本来源
    SAR患者：117例临床确诊为SARS患者的336份系列血清，采自2003年4～6月北京胸科医院SARS病房，根据卫生部颁发的《传染性非典型肺炎临床诊断标准（试行）》诊断，并经EIA检测为抗SARS CoV IgG阳性。其中男性44例，女性73例，年龄为19～61岁。
    与临床确诊SARS病人密切接触者：共410名，其中367名系在SARS病房工作1个月以上的医务人员，来自北医三院及北京胸科医院，包括153名医生，214名护士；另有43名系在生活中与临床确诊为SARS病人的密切接触者，接触时间从6h～14d不等，接触方式多为同宿舍、同实验室或同一家庭密切接触，均于接触30d后采血检测抗-SARS CoV IgG。该410名密切接触者中，男性148例，女性262例，年龄为20～57岁。
    未接触SARS的其他人群：813名未接触SARS病人的其他人群包括317名为福州市健康体检者血清；199名为哈尔滨市健康献血员血清（该两市血清均于2003年6月采集）；205名为2003年1月采集的广东省清远市吸毒者血清；92名为本实验室保存的2002年前乙型肝炎住院病人血清。

    检测方法
    EIA检测：抗-SARS CoV IgG检测试剂盒由华大吉比爱生物技术有限公司提供。用纯化的SARS CoV裂解液抗原包被微孔板。检测时严格按说明书操作。临界值（cut-off值）的设定：cut-off值=0.13+阴性对照A均值。若阴性对照A均值小于0.05，则按0.05计算。被检样本的A值大于临界值判为阳性反应，反之则为阴性。
IFA检测：2种IFA检测试剂盒分别由澳大利亚维多利亚州立传染病参与实验室及德国欧蒙公司提供。抗原分别由感染SARS CoV的Vero细胞和人淋巴细胞制备而成，待检血清分别为1∶75和1∶40稀释。血清与抗原反应后，加入荧光素标记的抗人IgG（γ链），37℃孵育30min后，在荧光显微镜下，观察荧光图像并判定结果。
免疫印迹试验（WB）：SARS CoV重组N和S蛋白由中国药品生物制品检定所提供。按常规操作并判定结果。
    抗-SARS CoV IgG抗体性判断标准：Alter等报告，应用EIA检测抗丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV），如样本的S/CO比值（即样本的A值/阳性临界值）<3.8时，可能为假阳性。因此，为排除假阳性，本研究对EIA检测结果为弱阳性（A<0.5）的样本，重复用EIA检测2次，重复阴性者判为阳性；同时用2种IFA检测，如2种IFA均为阳性，则判为阳性；如阴性，则用WB确证。

结　　果

    1.117例确诊为SARS患者的336份系列血清检测结果：由表1可见，SARS患者最早于发病第9天血清抗SARS CoV IgG阳转，随病程延长期阳性率逐渐上升，至发病后25d所有病人为阳转。

    2.与临床确诊为SARS病人的密切接触者血清检测结果：367名在SARS病房工作1个月以上的医务人员，用EIA初筛，8例抗-SARS CoV IgG抗体呈弱阳性（A<0.5）。对该8例血清再用EIA复测2次，除1例仍为阳性外，其余7例均为阴性。该8例EIA初筛为弱阳性血清，再用2种IFA检测，均为阴性。用EIA复检仍为阳性的1份血清，经WB确证为阴性。另43例在生活中与临床确诊为SARS病人有密切接触史者的血清，经EIA检测，抗SARS CoV IgG抗体均为阴性。
    3.未暴露SARS CoV人群的血清检测结果：813例未接触SARS病人的其他人群血清，用EIA初筛20例为弱阳性（A<0.5），后用EIA复测2次，11例为阴性，但9例仍为弱阳性（A<0.5）。该20例初筛EIA为弱阳性的标本，经2种IFA检测均为阴性。9例EIA复测仍为弱阳性标本，再用WB检测均为阴性。
    4.用EIA检测SARS患者和一般人群血清抗-SARS CoV阳性A值比较：由表2可见，117例SARS患者，79.5%（93/117）血清抗-SARS CoV阳性，A≥0.5;仅20.5%（24/117）A<0.5，但用IFA及WB检测均为阳性，用EIA检测其系列血清，其抗-SARS CoV阳性，A值呈上升趋势。但用EIA初筛1223例非SARS人群血清，其中28例为弱阳性，A值均小于0.5，后用IFA及WB检测均为阴性。