缺糖基转铁蛋白对酒精性肝病的诊断

摘要：
    目的　检测酒精性肝病（ALD）患者血清中的缺糖基转铁蛋白（CDT）与总Tf的比值%CDT，并与GGT、MCV、ALT、AST等指标比较，评价其对ALD的诊断价值。
    方法　选择健康不饮酒对照组、非酒精性肝病的其他肝病组（NALD组）、ALD组（3组均为男性），分别检测%CDT、GGT、MCV、ALT、AST等指标，各指标在不同组间的比较用F检验；各项之间的关系研究用直线相关，计算相关系数；同时绘制各指标的ROC曲线。
    结果　ALD组中的%CDT显著高于对照组、NALD组。%CDT诊断ALD的ROC曲线下面积为0.857，敏感度0.75，特异度0.88，而GGT这三者分别为0.751、0.75、0.76，MCV分别为0.669、0.30、0.78，ALT分别为0.512、0.25、0.72,AST分别为0.426、0.25、0.68。%CDT与GGT不相关，但两者联合检测敏感度提高到90%。
    结论　对于ALD的诊断，%CDT、GGT、MCV均具有一定的诊断价值，尤其%CDT是一个很好的辅助诊断指标。%CDT与GGT联用可提高敏感度。

    酒精性肝病（ALD）在我国已成为仅次于甲肝、乙肝等病毒性肝炎的肝病。诊断ALD的特异性生化指标，近来国外对缺糖基转铁蛋白（CDT）的研究较多。本研究用Bio-Rad的试剂对ALD患者血清中的缺糖基转铁蛋白与总转铁蛋白（Tf）的相对比值（%CDT）进行了检测，并与GGT、ALT、AST、MCV等指标进行了比较，评价其对ALD的诊断价值。

1　材料和方法

1.1　仪器与试剂　
    特定蛋白仪、生化分析仪及血液分析仪。%CDT为%CDT TIA试剂盒（Bio-Rad，批号194-5308）;ALT、AST试剂（威特慢公司，批号04-03）；GGT试剂（日本和光，批号TE828）；MCV为库尔特配套试剂。
1.2　研究对象
1.2.1　对照组（以下简称对照组）选择本院检验中无肝病史、平时不饮酒的健康体检者30例，均为男性，年龄在21～68岁，平均年龄41.2岁。
1.2.2　非酒精性肝病的其他肝病组（NALD组）选择本院传染科住院患者共20例，其中，乙型肝炎17例，丙型肝炎3例，均为男性、平时不饮酒，年龄在24～80岁，平均年龄48.6岁。
1.2.3　酒精性肝病组（ALD组）根据中华医学会肝脏病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组2001年制定的诊断标准，选择本院确诊的ALD男性患者20例，年龄在27～52岁，平均年龄43.6岁。
1.3　血样采集　
    清晨空腹抽血，自然分离血清，GGT、ALT、AST当天检测，%CDT于-22℃贮存，1月内检测完毕。
1.4　主要方法　
    %CDT是将血清用三氯化铁饱和（使所有的Tf均携带2分子的铁，以避免带铁量的影响）后采用离子交换层析分离CDT和非CDT组分，然后用免疫比浊法测定CDT与总Tf，计算出%CDT，据厂家说明书，其cut off值取2.6%；GGT、ALT、AST均为IFCC标准方法。
1.5　统计处理　
    各指标均绘制ROC曲线，计算ROC曲线下的面积（AUC），并比较敏感性和特异性。

2　结果

2.1　ALD组与对照组、NALD组的%CDT结果比较　见表1。

表1　ALD组与对照组、NALD组%CDT结果的比较

指标
（单位）
ALD组（n=20）
对照组（n=30）
NALD组（n=20）

X±s
阳性例数（%）
X±s
阳性例数（%）
X±s
阳性例数（%）
%CDT(%)
4.04±2.69
15(75.0)
1.92±0.47^*
4(13.3)
1.73±0.58^*
2(10.0)
GGT(U/L)
67.39±57.37
15(75.0)
17.63±8.34^*
0(0)
89.87±78.59^▲
12(60.0)
Mcv(fl)
93.50±4.63
6(30.0)
85.90±2.35^▲
0(0)
98.22±6.55^▲
11(55.0)
ALT(U/L)
35.75±10.73
5(25.0)
21.45±7.94^▲
1(3.3)
140.42±131.02^*
13(65.0)
AST(U/L)
31.99±9.92
5(25.0)
26.08±9.22^▲
1(3.3)
107.62±76.87^*
15(75.0)

注：与ALD组比较，*P<0.01 ▲P>0.05；%CDT的结果：对照组与NALD组无显著差异，可合并，其X±1.96s为1.84±1.02
2.2　%CDT诊断ALD的ROC曲线
2.3　各指标对ALD的诊断价值　见表2

检测指标	ROC AUC（95%可信区间）	敏感度	特异度
%CDT（%）	0.857(0.732～0.982)	0.75	0.88
GGT（U/L）	0.751(0.634～0.868)	0.75	0.76
MCV（fl）	0.669(0.540～0.798)	0.30	0.78
ALT(U/L)	0.512(0.368～0.656)	0.25	0.72
AST(U/L)	0.426(0.295～0.557)	0.25	0.68

注：%CDT的cut-off值2.6%，其他指标的cut-off值取其参考范围的上限。
2.4　将%CDT与GGT的检测结果进行直线相关分析，其相关系数r=0.031，无相关关系。
2.5　将%CDT与GGT联合检测，二者只要有一阳性则判为阳性，其ROC AUC为0.797，敏感度提高到0.90，特异性下降为0.62。

3　讨论

    本文选择对象时，避免了性别、年龄对CDT的浓度或比例可能存在的影响。从表1可以看出，非ALD的肝脏损伤基本不影响%CDT，而GGT和MCV受影响较大。本研究%CDT对ALD的诊断价值较大（ROC曲线下面积为0.857，敏感度0.75，特异度0.88），GGT、MCV次之，而ALT、AST诊断价值不大。GGT和%CDT无相关关系，二者联用可提高敏感度。
    本文采用的试剂盒检出的CDT含50%的三唾液酸转铁蛋白，与文献[2]有异，但结果显示其对ALD的诊断效率较高。有关%CDT的cut off值的确定，本文参考试剂说明书，以2.6%为cut off值，如以本文所测参考范围（x±1.96s）的上限，即2.86%作为cut off值，则其特异度提高为0.92，诊断更准确。
    尽管CDT是诊断ALD的良好指标，但目前ALD导致CDT升高的机理尚未完全清楚，很可能是乙醇和/或乙醛影响了高尔基器中N-糖链的合成。有学者认为，乙醇和/或乙醛介导的肝唾液酸酶活力的升高和高尔基器中的糖蛋白糖基转移酶（唾液酰基转移酶、半乳糖基转移酶、N-乙酰葡糖胺基转移酶）活力的降低很可能是酒精导致鼠和人血清中CDT升高的原因。有关CDT升高的机制及仍需进一步研究。