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Fg12凝血酶原酶多肽抗体的制备和应用
发布时间04年12月02日 09时48分
 

韩梅芳,宁琴,严伟明,习东,Laisum fung, Gary Levy,罗小平

 

    摘要:目的  利用人工合成多肽制备针对人源、鼠源fg12凝血酶原酶(hfg12、mfgl12)的特异性多克隆抗体,以期用于与fgl2表达异常密切相关的疾病的研究和诊治。方法  根据mfgl12、hfg12基因编码的氨基酸序列合成多肽3(Pep3)和多肽4(Pep4),并用化学方法与匙孔血蓝蛋白(KLH)连接,纯品Pep3-KLH和Pep4-KLH免疫动物,所制备的抗血清用ELISA、Westem blot和前凝血质活性(PCA)实验鉴定,并用免疫组化法应用于乙型肝炎患者肝组织中hfgl2的检测。结果  ELISA检测表明,所制备的抗血清可分别与Pep3和Pep4发生特异性免疫反应;Westem blot结果显示,抗血清可识别MHV-3感染BALB/cJ小鼠腹腔巨噬细胞特异性条带,相对分子质量(Mr)为65×103;PCA实验提示,抗血清具有中和mfg12分子酶活性的作用。对病毒性乙型肝炎患者肝组织免疫组织化学染色hfg12仅在重型乙型肝炎患者高表达,而在慢性乙型肝炎和肝硬化患者的肝组织中无表达。结论  所制备的fg12的多肽抗体(多克隆抗体)可识别mfg12和hfg12分子,具有与抗原特异性结合、中和其酶活性的特征,为深入研究这一新发现的分子提供了有力的科学手段。

 

摘自:《中华微生物和免疫学杂志》2004年第8期

 

 
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