朱利  俞守义  陈清 蔡俊鹏

    摘要：目的  为监测环境中的霍乱弧菌，建立原位PCR（in situ PCR,ISPCR）检测方法。方法  纯培养的霍乱弧菌为实验材料，霍乱毒素基因（ctxAB）为靶序列。4%多聚甲醛固定细胞，1mg/ml溶菌酶消化20 min，PCR反应体中加入2.5%甘油，以荧光素标记的引物为标示物，在液相环境下，进行靶序列的ISPCR。结果  经蓝光激光，荧光显微镜下有扩增产物的细菌发出明亮的绿色荧光，阴性对照则荧光。结论  由于ISPCR既能检测靶序列，又保护了细菌形态，可以在检测中省去细菌培养的过程，因此，为快速而准确的检测中霍乱弧菌提供了一种新方法。

摘自：《中华微生物和免疫学》2004年第9期