吴国球  劳心珍 孙宏伟  黄立新  张粉梅  钱娟英  卢惠霞
东南大学附属中大医院临床检验中心  中国药科大学生物技术中心

   摘要：目的 建立检测人心肌肌钙蛋白I（cTnI）化学发光免疫分析方法。方法  用重组cTnI免疫新西兰兔获得抗体，经DEAE-23层析和（NH4）2SO4沉淀纯化后，用碳化二亚胺（EDC）法标记辣根过氧化物酶，Sephadex G-200纯化。优化鲁米诺-H2O2-肉桂酸发光体系，建立了cTnI化学发光免疫分析法。用该法检测138例正常人及病人血清标本，确定正常值参考范围，并与ELISA法比较。结果  所得抗体的滴度为1:8000。优化后的发光体系为：鲁米诺（4.5 mmol/L），H2O2（7.5 mmol/L）,四苯硼钠（0.8 mmol/L），肉桂酸（0.4 mmol/L），比单独用肉桂酸或四苯硼钠作增强剂灵敏度分别增加了1.19和1.05倍。本法检测灵敏度为0.2 ng/ml，线性范围为0.4～50 ng/ml，批内CV平均9.0%，批间CV平均11.8%，回收率为104.2%。Hb浓度在0～50 mmol/L，T-Bil在0～15μmol/L，TG在0～2.0 mmol/L对测定结果无影响。与ELISA比较，两法结果一致（P>0.05），相关系数r=0.9852(P<0.01)。用BioCheck标准品为校正物，确定临床诊断参考范围为<2.12 ng/ml，诊断符合率为96.2%。结论 建立的cTnI化学发光免疫分析法可常规用于临床检验。

摘自：《临床检验杂志》2004年第5期