流式细胞仪上已可开展多种方法来检测胞浆内抗原。这些检测方法在单细胞水平检测与肿瘤发展相关的蛋白时格外重要。Bcl-2 和 p53是两种最为相关的蛋白。在目前研究中,我们比较了五种不同固定破膜方法和九种FITC或PE标记的单克隆抗体:四种直标的抗Bcl-2和五种抗p53抗体。为了检测Bcl-2,我们分析了三种Bcl-2阳性细胞系(K562, Daudi 和 MCF-7),和从9个正常人采集的外周血样本。为了区分内部阳性细胞(淋巴细胞)和阴性细胞(粒细胞),有必要同时检测表面和胞浆内抗原。为检测p53,共分析了三个细胞系,二个p53阳性细胞系(Raji 和 CEM)和一个p53阴性(HL-60)细胞系。使用这些细胞我们进行了综合检测来分析单克隆抗体和样本制备技术的有效性。
结论为:克隆号为124的FITC标记的Bcl-2(DAKO公司)和克隆号为Bcl-2/100的PE标记的Bcl-2(BD公司),BP53.12-FITC 和 G59-12-PE (p53) 可提供最高特异性的染色,而不受样本处理的影响。 摘自:Cytomics网 !-- content_end> |