基本原理

    IgG1/IgG1/CD4 or CD8 (阴性对照)：这些阴性对照包括有与检测抗体一致的同型免疫球蛋白（如IgG），来去除CD4或CD8阳性群体的非特异性结合。十字门的左下象限应包含有98-99%的阴性群体。

    CD4/CD19/CD8 (调节补偿)：在一些方案中，仪器的荧光补偿可通过标记没有交叉抗原表达的两群细胞进行设置。

    CD62L/CD45RA/CD4：这个抗体组合应设门检测CD4+的细胞。此组合用于识别童真CD4细胞，而它是CD62L+/CD45RA+。识别此童真细胞亚群十分有用，当HIV疾病处于进展期时它的数量下降，而当接受HAART后其数量又会增加。在后一种情况下，它有助于区分病人在经HAART治疗后CD4数量增加是由于外周血中现有淋巴细胞亚群扩增而产生的童真细胞（胸腺增生和正直的免疫重建）。在检测此管时十字门的位置往往与阴性对照不符，为了避免不正确地划分细胞。建立一个与CD62L/CD45RA所分析细胞一致的单参数直方图显示CD45RA+的荧光峰，在此图上可比较直观地确定十字门垂直界线。理想情况下，双参数点图上的CD45RA%数量应与CD45RA单参数直方图的数量一致。在检测CD62L/CD45RA/CD8抗体组合时可使用类似的设门方法。

    CD4/CD45RO/CD3：这个抗体组合用于检测设门于CD3+阳性的细胞群体。此组合用于识别CD4T细胞中的记忆型细胞亚群，它是CD45RO+。当HIV感染时此群细胞不成比例地增加。记忆型细胞可通过以上童真标记组合来间接反应出来，如记忆型细胞通常分布在象限I，III和IV中。十字门的位置有时需要调整来避免错误划分细胞群体。

    HLA-DR/CD38/CD4：这个抗体组合用于检测设门于CD8+阳性的群体。此组合用于识别活化的CD8细胞，它是HLA-DR+/CD38+。这个CD8亚群细胞当HIV感染时高度扩增，对疾病的进程有重要的预后意义。这个细胞亚群对于在HAART中的儿童的60个变量参数中是个强大的指示器，具有极重要的驱势指示作用。HLA-DR/CD38/CD8 和 CD4的十字门必须在阴性对照的基础上重新设置。

    CD19/CD38/CD3：这个抗体组合用于检测设门于CD3阴性的细胞群体。此组合可用于识别活化的B细胞，它是CD38+。这个细胞群体在HIV感染后会扩增。

    CD28/CD95/CD8：这个抗体组合用于检测设门于CD8+阳性的细胞群体。CD28是介导T细胞-抗原活化的共刺激分子，CD95是FAS抗原与细胞凋亡有关。CD28亚群随HIV病程发展时数量降低，而CD95+细胞群体数量增加。此抗体组合目的在于区分CD28+/CD95- 或 CD28-/CD95+的CD8细胞群体。十字门的横轴应置于散点图右下CD28+/CD95-群体的顶端，此轴位置经常会较同型对照明显增高。如果CD28+/CD95-群体太窄而无法确认坐标轴位置时，可将十字门横轴置于CD28/95阳性细胞的下方。分析同一门内细胞的CD95单参数直方图，结合另一包含所有CD28+细胞的门有时可用于指导划分细胞。*见CD28/95双参数点图。在检测CD28/CD95 / CD4时应使用相同的十字门设置。

    CD3/CD 16+56/CD45：这个简单组合可用于识别NK细胞，它是CD3-/CD16+56+，使用CD45设门。因为NK细胞直接对IL-2起反应并在没有其他刺激下发生扩增，这个组合将在含有IL-2的免疫调节治疗中有重要作用。

    CD45RO/CD45RA/CD8：这个抗体组合可识别童真CD8细胞和记忆型CD8细胞，使用CD8设门。研究发现青春期的HIV+病人童真CD8细胞较儿童或成人送减少降低。因此，此抗体组合可能在监测青少年免疫反应时有用。注意：在这个组合中比较难设定十字门的位置，因为缺乏双阳性（RO+/RA+）CD8+NK和过渡T细胞。在使用此组合时，在发送实验室报告时需出示典型图例和设门说明。

摘自：Cytomics网