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实验室生物安全与生物安全柜在临床中的合理使用
发布时间05年03月03日 09时31分
 

  Yuan-li Mao

    随着人们对感染性疾病危害性认识的不断加深,特别是经过2003年和2004年SARS在多个国家的流行及通过实验室感染,使生物安全成为重要的国际热点问题。本文将对实验室生物安全水平以及如何合理配置、使用生物安全柜作一介绍。

   一、 微生物风险度评估

   微生物种类繁多,包括真菌、细菌、放线菌、病毒、立克次体、螺旋体、支原体衣原体等类群,其中能引起人类疾病的通称为病原性微生物。病原性微生物按危险程度分为四组:

    1 类风险组,指对个体和社会无危险或危险性较低的微生物;

    2 类风险组,指对人或环境具有中等潜在危害的微生物;即某种病原体,能引起人类或动物疾病,但对实验室人员、社会、牲畜或环境不太可能具有严重的危险性,实验室暴露可能引起严重感染,但具有有效的治疗方法及预防措施,并且感染的传播性有限。

    3 类风险组,主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有预防传染的疫苗和治疗药物;某种病原体,通常能引起严重的人类或动物疾病,但一般不会从一个个体传染给他人,具有有效的治疗方法及预防措施。

    4 类风险组,对人体和环境具有高度的危险性,通过气溶胶途径传播或传播途径不明,目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。

   二、生物安全实验室的分类、分级及适用范围

    一般说来,生物安全实验室分为如下四个级别:

    1. 生物安全1级实验室(BSL-1)

    实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物,如用于教学的普通微生物实验室等。

    2. 生物安全2级实验室(BSL-2)

    实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。

    3. 生物安全3级实验室(BSL-3)

    实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有预防传染的疫苗和治疗药物。

    4. 生物安全4级实验室(BSL-4)

    实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性,通过气溶胶途径传播或传播途径不明,目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。

    值得特别注意的是,当出现新型不明微生物时,也必须在四级生物安全防护实验室中进行。待有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低级别的实验室中处理。

    三、 生物安全柜

     1. 定义

     生物安全柜是用于实验室的主要隔离设备,可以防止有害悬浮微粒的扩散,对实验者、实验物和环境提供保护,安全应用于对高危险微生物、有毒物质和放射寡核苷酸的操作。

     2. 生物安全柜按照NSF49标准分类

     A、 B1、B2、B3四个类型。

    A型:70%气体循环,30%气体排放室内;

    B1型:30%气体循环,70%气体由管道排放至废气通道;

    B2型:0%气体循环,100%气体由管道排放至废气通道;

    B3型:70%气体循环,30%气体由管道排放至废气通道。


    3. 生物安全柜根据表面风速的不同,又可分为I级、II级和Ⅲ级。

表1  I级、II级和Ⅲ级生物安全柜的区别

 

BSC

表面风速(m/s

%气流

排风系统

再循环

排出

I

0.36

0

100

硬管道

IIA1

0.38-0.51

70

30

排到室内或套管式的连接

向室外排风的IIA2

0.51

70

30

排到室内或套管式的连接

IIB1

0.51

30

70

硬管道

IIB2

0.51

0

100

硬管道

Ⅲ级

NA

0

100

硬管道

 
  四、生物安全柜的选择
 
   选择生物安全柜选择原则要根据保护类型的需要,即:
 
   1. 只对人员进行保护;

   2. 同时对人员、产品和环境进行保护;

   3. 对人员的保护程度。

   其中,对人员的保护程度是指微生物危险组1到危险组4的程度以及生物实验室的安全程度。表2表3列出了何种BSC被推荐用于何种保护以及各级生物安全水平实验室对应的生物安全柜不同级别配置。

表2  根据保护类型的需要选择适宜的生物安全柜
 
 

BSC的选择

针对危险组1-3微生物的人员保护

I级、II级、Ⅲ级

针对危险组4微生物的人员保护、手套箱实验室

Ⅲ级

针对危险组4微生物的人员保护、防护服实验室

I级、II

产品保护

II级,仅当涉及层流时用Ⅲ级

针对微量的不稳定的放射性核/化学药品的保护

IIB1,向室外排风的IIA2

针对不稳定的放射性核/化学药品的保护

I级、IIB2、Ⅲ级

 

表3  对各级生物安全水平实验室的要求

 

生物安全级别

 

一级

二级

三级

四级

生物安全柜

 

 

 

 

-I

不需要

随意

需要

不需要

-II

不需要

最好有

需要

需要,在防护服实验室中使用

-Ⅲ级

不需要

不需要

最好有

需要,在安全柜室使用

 
 

    总之,使用者应该根据本实验室所从事的工作性质以及生物实验室安全水平的需要来合理选择、配置生物安全柜。

  五、 生物安全柜的作用

   正确使用生物安全柜是保证实验室安全的重要环节,以下几点需要在使用生物安全柜时应得到注意:

   1.应参照国家标准和相关文献向所有使用人员阐明生物安全柜的使用方法。要建立书面的规程或安全手册、或操作手册。

   2.生物安全柜只有能正常运转时方可使用。

   3.使用生物安全柜时,不要打开前窗。

   4.柜内尽量少放仪器和物品。不要阻塞安全柜气口处的空气流通。物品要经过表面净化才可放到柜内的工作区。

   5.禁止在柜内使用酒精灯。它产生的热量会改变气流方向,也可能破坏滤板。建议使用无菌的一次性接种环。

   6.在柜内的所有工作都要在工作台中央或后部进行,并且通过观察窗能看见柜内的操作。

   7.尽量减少操作者后面的人员走动。

   8.操作者不要因频繁移动及挥动手臂破坏气流。

   9.前面的空气栅格不要被实验室器材或其它物品堵塞,因为这样会干扰气流,引起潜在材料的污染和操作者的暴露。

   10.在操作结束后或下班前,应使用消毒剂擦拭生物安全柜的台面。

   11.一年一度的检定:每台BSC的安装和安全性测试都应该参照国际和国家的执行标准,BSC的有效防护的评估应当包括完整性的测试、滤板渗露、向下的空气流速、表面风速、负压/气流比、气流模式、警报等测试。完成这些测试应由合格的专业人员来进行。

摘自:《检验诊断与实验室自动化》2004年第8期

 

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