范小勇等

   目的 建立一套等位基因特异性扩增(ASA)的检测体系，用于结核分支杆菌对利福平耐药性的快速检测。方法 根据结核分支杆菌野生型基因设计ASA特异性引物，ASA PCR扩增39株结核杆菌利福平耐药株的rpoB基因，经琼脂糖凝胶电泳检测，进而推断利福平的耐药性；同时进行DNA序列测定以验证ASA法的检测结果，并分析上海地区结核杆菌rpoB基因的突变特点。结果 在39株利福平耐药株中共检出36株，敏感性为92.3%；与DNA测序结果的符合率为87.2%，并鉴定了11种不同类型的41种突变形式，其中包括9种点突变和2种基因缺失。结论 用等位基因特异性扩增法分析结核分支杆菌的rpoB基因突变具有较高的特异性与敏感性.该法快速、简便、可靠，可应用于临床利福平耐药性的检测。

摘自：《中国生物制品学杂志》2004年第6期