邱业峰等

   目的 扩增抗癌胚抗原单链抗体（CEA-ScFv），与绿脓杆菌外毒素（PE40）进行重组及原核表达，旨在进一步研究重组蛋白CEA-ScFv-PE40的靶向抗肿瘤作用。方法 分别扩增抗癌胚抗原单链抗体的重链区、轻链区，用overlap PCR按照VH-VL的顺序连接，克隆至pMD18T载体中。再将VH-VL基因片段与含有PE40的表达载体pET28a连接，转化BL21（DE3），IPTG诱导表达。结果 经DNA测序，其结果与设计完全相符。SDS-PAGE分析，在相对分子质量66000处可见明显表达带，表达量可占菌体蛋白总量的13%以上。免疫印迹表明重组蛋白具有PE40的抗原特异性。结论 抗癌胚抗原单链抗体-PE40免疫毒素的成功克隆与表达，为进一步研究其生物活性奠定基础。

摘自：《中国生物制品学杂志》2004年第3期