陶庆春 安鹏 陈小丹 细菌的鉴定是细菌分类的实验过程。长期以来,临床微生物实验室一直沿用100多年前由Gram、Pasteur、Koch、Petri等创造的传统的微生物学鉴定方法,这些传统的鉴定方法不仅过程烦琐,费时费力,且在方法学和结果的判定、解释等方面易发生主观片面而引起的错误,难以进行质量控制。 20世纪60年代以后,微生物学家和工程技术人员密切合作,对微生物的研究采用了物理的、化学的分析方法,发明了许多自动化仪器,并根据细菌不同的生物学性状和代谢产物的差异,逐步发展了微量快速培养基和微量生化反应系统,使原来缓慢、烦琐的手工操作变得快速、简单,并实现了自动化和机械化。微生物鉴定自动化方法,包括(1)临床微生物鉴定系统;(2)气液色谱分析;多用于研究;(4)化学发光技术;可鉴定一些细菌少数分枝杆菌属和一些真菌。80到90年代发展迅速,并广泛用于临床。1985年第一台自动化细菌分析化仪器Vitek-AMS进入中国并成功使用。1999年底法国梅里埃公司推出VITEK2系统,从接种物稀释、密度计比较及卡冲填和封卡等步骤均实现了全自动化。目前已有多种微生物自动鉴定及药敏测试系统问世,如VITEK-Au-toMicrobicSystem(AMS)、PHOENIXTM、MicroScan、Sensi-titre、ABBott(MA-2 System)、AUTOBACIDXSys-tern等。这些自动化系统具有先进和微机系统,广泛的鉴定功能,适用于临床微生物实验室。卫生防疫和商标标系统,主要功能包括细菌鉴定、细菌药物敏感性试验及最低抑菌浓度(MIC)的测定等。其准确性和可靠性均已大大提高。 系统反应 | 需要生长 | 分析 | 阳性结果显示 | 系统例子 | PH基础反应(多为15-24小时) | 是 | 碳源利用 | PH指示剂颜色变化;利用碳源源产生酸,利用氮源产碱 | API CrystaIV ITEK MicroScan | 酶谱(多为2-4小时) | 否 | 微生物已有的酶 | 当无色复合物被适当酶水解时,色源/荧光源释放引起颜色变化 | Microscan IDS (Remel) | 碳源利用 | 是 | 有机产物 | 因转移电子至无色四唑氮标记碳源使染料变为紫色 | Biolog | 挥发的或非挥发的酸检测 | 是 | 细胞脂肪酸 | 以检测代谢产物以基础的层析技术,与数据库中的数据相比较 | MIDL | 生长可见检测 | 是 | 不同底物 | 微生物利用某一底物产生浊度 | 酵母样菌 |
2用上述原理的各种鉴定系统可鉴定肠杆菌科,非发酵菌,革兰阳性球菌,革兰阴性球菌,厌氧菌和酵母菌。目前较完善的鉴定系统性能比较。 自动鉴定系统性能比较性能 | Vitek | AutoSCAN-4 | Walk/Away | Senititre | 无限 | 60 | polor | 系统内容 | 32/60/120 | 无限 | 40/96 | 92 | | | 无限 | 数据库中可鉴定菌种数 | | | | | 566 | 480 | | 需氧革兰阴性杆菌(NG) | 116 | 112 | 139 | 147 | 246 | 240 | 78 | 需氧革兰阳性球菌 | 50 | 49 | 49 | 否 | 否 | 815 | 否 | 厌氧菌 | 否 | 58 | 54 | 否 | 否 | 50 | 否 | 苛氧菌 | 否 | 21 | 20 | 否 | | 194 | 否 | 酵母菌 | 36 | 40 | 42 | 否GN中孵育 | 否 | 28 | 否 | 分枝杆菌 | 否 | 否 | 否 | 否 | 手工 | 自动 | 否 | 接种 | 自动 | 手工 | 手工 | 自动 | 分开 | 联机 | 自动 | 孵育 | 联机 | 分开 | 联机 | 联机 | 4或16h | 30min | 分开 | 需氧革兰阴性杆菌 | 2-18h | 24或48h | 2或15-42h | 5或18h | 4或16h | 30min | 18-24h | 需氧革兰阳性球菌 | 2-15h | 24或48h | 2或15-42h | | | 30min | | 厌氧菌 | 否 | 4h | 4h | | | 30min | | 酵母菌 | 24或48h | 4h | | | | 30min | | 分枝杆菌 | 否 | | | 否 | 否 | 否 | | 手工加试剂 | 否 | 是 | 否 | 室温 | 4 | 室温 | 是 | 贮存温度(℃) | 4 | 室温,4 | 室温,4 | | | | 室温 | 其它性能 | | | | 是 | 否 | 否 | | 药敏试验 | 是 | 是 | 是 | 否 | 否 | |
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