饶国洲 李昂 景娟 姚天华 石建锋 摘要:目的 建立一种从不同生物体来源的组织材料中进行简单,快速、高纯化分离RNA的方法。方法 利用胍盐裂解并抑制RNA的降解,用特异的RNA吸附剂吸附;通过清洗液的清洗和洗脱液洗脱,获得高纯化RNA。并用该方法在HL-60细胞中分离总RNA,进行RT-PCR扩增Human TFR(Transfrrin Receptor)基因,结果 RNA总得率大于80%;纯度高(A260/2801.9~2.0);产量稳定(平均10~15ug/1×106细胞,1~5ug/mg组织,2.5~5ug/ml全血,50~100ug/1×109细菌.10~20ug/1×108酵母菌);时间短(20~45min),无基因组DNA污染,RNA降解少,完整性较好,Human TFR RT-PCR扩增电泳结果显示出1.0kbp,2.0kbp,4.4kbp的DNA片段.结论 该方法操作简便,快速,适用于普通实验室对RNA的分析研究工作. 摘自:《现代检验医学杂志》2005年11月第20卷第6期 !-- content_end> |