何俊 丁敏 张晓清 袁泰先 摘 要:目的建立一种柱前衍生反相高效液相色谱-荧光检测法同时测定血浆同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)、半胱氨酸(cysteine, Cys)、半胱氨酰甘氨酸(cysteinylglycine, CysGly)、谷胱甘肽(glutathione, GSH)的方法.方法以tris-(2-carboxylethyl)-phosphine (TCEP)为还原剂,7-fluorbenzo-2-oxa-1, 3-diazole-4-sulfonate (SBD-F)为衍生剂,N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcystine,NAC)为内标,C8柱分离.流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液(25 mmol/L,pH 3.0),梯度洗脱,激发波长(λex)380 nm,发射波长(λem)510 nm,内标标准曲线法定量.结果Hcy、Cys、CysGly、GSH的线性范围分别为1.0~160.0 μmol/L,30.0~1 040.0 μmol/L,2.0~300.0 μmol/L,1.0~130.0 μmol/L,具有良好的相关性,r为0.999 4~0.999 9.最低检测限为0.1~2.0 μmol/L.日内精密度不超过3.0%,日间精密度除GSH为13.21%外均小于6.0%.平均回收率为87.24%~114.99%.结论本方法准确、灵敏、快速、特异,适合于实验室研究和临床常规检测. 摘自《中华检验医学杂志》2006年第3期 !-- content_end> |