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高效液相色谱法同时测定血浆同型半胱氨酸及其相关硫醇物浓度方法的建立
发布时间2006年7月17日14时08分
 

  

何俊  丁敏  张晓清  袁泰先 

摘 要:目的建立一种柱前衍生反相高效液相色谱-荧光检测法同时测定血浆同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)、半胱氨酸(cysteine, Cys)、半胱氨酰甘氨酸(cysteinylglycine, CysGly)、谷胱甘肽(glutathione, GSH)的方法.方法以tris-(2-carboxylethyl)-phosphine (TCEP)为还原剂,7-fluorbenzo-2-oxa-1, 3-diazole-4-sulfonate (SBD-F)为衍生剂,N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcystine,NAC)为内标,C8柱分离.流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液(25 mmol/L,pH 3.0),梯度洗脱,激发波长(λex)380 nm,发射波长(λem)510 nm,内标标准曲线法定量.结果HcyCysCysGlyGSH的线性范围分别为1.0160.0 μmol/L,30.01 040.0 μmol/L,2.0300.0 μmol/L,1.0130.0 μmol/L,具有良好的相关性,r0.999 40.999 9.最低检测限为0.12.0 μmol/L.日内精密度不超过3.0%,日间精密度除GSH13.21%外均小于6.0%.平均回收率为87.24%114.99%.结论本方法准确、灵敏、快速、特异,适合于实验室研究和临床常规检测.

                                   摘自《中华检验医学杂志》2006年第3

 
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