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等温扩增检测耐药基因mecA方法的建立及其临床应用
发布时间2006年8月8日10时26分
 

  

申建维  王旭  范春明  孙秀琴  杜万英  万玉梅  彭铁汉  袁玮 

摘 要:目的建立环介导的等温扩增快速检测葡萄球菌耐药基因mecA的方法.方法利用包被有SPA单克隆抗体的磁珠富集样品中的金黄色葡萄球菌,快速提取其DNA,用环介导的等温扩增反应(LAMP)扩增金黄色葡萄球菌耐药基因mecA,扩增条件为65°C保温1 h.在反应过程中,荧光探针与mecA基因的扩增产物互补序列结合,产生荧光,通过检测反应管中的荧光值来判定结果.结果该方法的最低检测限为10 CFU/ml,M-H培养基苯唑西林药敏试验结果相比较,灵敏性99%,特异性90.9%;而与PCR方法比较,灵敏性100%,特异性100%;试验时间缩短为1 h.结论该方法具有灵敏度高,特异性强,操作简便快速,适用于检测临床标本中的MRSA.

摘自《中华检验医学杂志》2006年第2

 
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