王笑峰　 孙坚萍　 罗兵　 王云　

摘　要：目的构建人疱疹病毒7型(HHV7)被膜蛋白pp85编码基因(ORF U14)的原核表达载体,并进行原核表达.方法应用HHV7标准株Glasgow感染SupT1细胞,PCR技术扩增HHV7 ORFU14基因的主要抗原决定簇编码区(328～533 AA),目的基因与原核表达载体pThioHis A连接后,转化宿主菌E.coli BL21,IPTG诱导融合蛋白表达,经镍-螯合物琼脂糖树脂柱亲和层析纯化获得重组抗原.重组蛋白电泳后转至PVDF膜,与HHV7阳性血清进行免疫印迹反应.结果DNA序列分析表明,目的基因序列与HHV7标准毒株Glasgow相应序列完全一致,SDS-PAGE可观察到相对分子质量(Mr)为35.7×103融合蛋白的表达,免疫印迹反应显示重组抗原具有较高的特异性.结论HHV7重组抗原具有较好的抗原性,进一步完善后可用于HHV7抗体的检测.

摘自《中华微生物学和免疫学杂志》2006年第1期