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荧光定量PCR检测细菌染色体上基因拷贝数
发布时间2006年9月25日16时35分
 

  

刘广文  闫梅英  梁未丽  高守一  阚飙 

摘 要:目的建立一种以细菌染色体上1个已知拷贝管家基因作为基准、通过荧光定量PCR检测其他被检基因拷贝数的方法.方法利用荧光定量PCR检测El Tor型霍乱弧菌染色体上目的基因zot与基准基因thyACt(threshold cycle)值差值,根据已知拷贝数菌株N16961的两基因Ct值之差来推算待测菌株中zot基因的拷贝数.结果利用thyA基因作参照,确定11E1 Tor型霍乱弧菌中zot基因的拷贝数在15个之间,对较少拷贝数的检测与Southern blot确认的相同,对多拷贝数检测优于Southern blot的判定.结论本方法可以准确检测菌株染色体上的基因拷贝数.

摘自《中华微生物和免疫学杂志》2006年第4

 
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