吴国球　 张臣　 孙宏伟　 赵成桂　 芦惠霞　

摘　要：目的克隆人乳腺珠蛋白(human mammaglobin,hMaM)基因,建立荧光定量PCR方法,探讨外周血hMaM mRNA的表达作为乳腺癌血行微小转移标志物的可能性.方法设计特异引物,用RT-PCR方法从乳腺癌组织扩增获得目的片段,利用T/A克隆将PCR产物插入pMD-18T载体;优化扩增条件,以pMD/M质粒制备标准曲线,建立FQ-PCR方法,对乳腺癌不同分期的患者(n=28),乳腺良性疾病患者(n=15),其他肿瘤患者(n=33)的外周血进行检测.结果成功获得hMaM基因并完成克隆,阳性克隆测序结果与预期序列一致;建立了FQ-PCR检测hMaM mRNA方法;28例乳腺癌病人中9例(32.1%)阳性(Ⅰ期4例,Ⅱ期3例,Ⅲ期1例,Ⅳ期1例),hMaM mRNA的表达与乳腺癌病理分期无关(x2=0.5936;P＞0.05);乳腺良性疾病组,其他肿瘤病人组及对照组外周血中均未检出hMaM mRNA.结论hMaM mRNA是乳腺癌特异性标志物,其外周血的表达可作为乳腺癌血行微小转移的指标.

                                       摘自《临床检验杂志》2006年第2期