Evaluation of Multiplexed Fluorescent Microsphere Immunoassay for Detection of Autoantibodies to Nuclear Antigens

Thomas B. Martins, Rufus Burlingame, Carlos A. von Mu¨hlen, et al.Clinical And Diagnostic Laboratory Immunology, 2004, 11(6): 1054–1059

目的：在多种胶原蛋白血管病的外周血中均存在多种抗可提取性细胞核抗原（ENA）的抗体，对这些自身抗体进行检测对于此类疾病的诊断和预后具有重要的临床价值。本研究旨在通过一系列实验对多指标荧光微球免疫分析方法（MFMIA）在抗核抗体临床检测中的应用进行科学评估。

方法：利用多指标荧光微球免疫技术，对包括56个系统性红斑狼疮的249个血清标本进行检测。将5种不同颜色的微球分别交联上SSA、SSB、Sm、RNP以及Scl-70的抗原，第6种微球交联上人免疫球蛋白（IGG）做为内控，经过加样、孵育等一系列步骤后，在luminex 100机器上读数，定量分析检测结果。

结果：与传统ELISA相比，多指标荧光微球免疫分析方法在重复性、灵敏度以及特异性上分别是：SSA，99.1%、100.0%、98.8%；SSB，98.6%、88.9%、99.5%；Sm，97.6%、95.8%、97.9%；RNP，97.2%、92.7%、98.8%；Scl-70，93.6%、50.0%、99.0%。多指标荧光微球免疫分析方法对56个系统性红斑狼疮的血清检测中，五个自身抗体的出现频率分别是：21.4% SSA, 7.1% SSB, 10.7% Sm, 32.1% RNP,以及0% Scl-70。而在ELISA的检测方法中，各指标的出现频率分别是：23.2%、10.7%、12.5%、33.9%以及5.4%。

结论：在其中的四种自身抗体检测中，多指标荧光微球免疫技术与单指标检测的ELISA技术有着非常好的相关性，最显著的差异是在Scl-70的检测上，和各种文献数据相比，该指标的检测在多指标荧光微球免疫技术中应该是最准确的。本研究显示出多指标荧光微球免疫技术在血清标本中检测自身抗体，是一种灵敏度、特异性都很好的方法。