Use of Microsphere Immunoassay for Simplified Multianalyte Screening of Thyrotropin and Thyroxine in Dried Blood Spots from Newborns

Zoltan Lukacs, Caroline Mordac, Alfried Kohlschutter, et al.Clinical Chemistry, 2003, 49(2): 335-336

目的：先天性甲状腺功能低下临床检测一般表现出来的是TSH的升高以及T4的降低。然而，至今为止，对TSH以及T4的检测都要采取两套独立的程序来进行，本研究旨是在Luminex公司的多指标并行分析系统上研究同时检测TSH和T4的方法。

方法：利用竞争性抑制法检测T4以及双抗夹心法检测TSH，分别在两种不同颜色的编码微球上共价交联上TSH单克隆抗体和T4牛血清蛋白。经过洗提、过滤后的滤纸干血片标本，加入混合微球以及生物素标志的T4抗体，孵育45min后，再加入生物素标志的TSH抗体，孵育1h，整个过程无需洗涤。最后，加入链亲和素标记的藻红蛋白，反应结束后，在Luminex机器上读数，分析。

结果：TSH的线性方程是Y=5.6887x＋36.057，R²=0.992,在全血标本中，检测动力学范围是0－200Miu/L，超出人体正常生理浓度的10倍；T4的指数曲线方程是Y＝1095.4e^－0.1519x，R²＝0.9882，全血标本的检测范围是0－257 Miu/L，超出人体正常生理浓度的2倍。干血片样本中，T4和TSH检测的极限分别是12.6nmol/L（0.98ug/dL）以及1.36 Miu/L。TSH和T4的CV分别是3.6％～16％以及7％～15％。

结论：该技术使得对TSH以及T4的检测变得更简单、更快速了。在将来的临床检测中，高通量的检测技术是必不可少的，而Luminex的多指标并行分析系统正符合这一要求，在将来的检测中，会发挥越来越大的价值。

Fig. 1. Calibration curves for the simultaneous determination of TSH and T4indried blood spots with use of the LabMap technology.All concentrations are given in volumes of wholeblood. (A), linear curve for TSH; (B), exponentialcurve for T4.