Protein Bead Array for the Detection of HIV-1 Antibodies from Fresh Plasma and Dried-Blood-Spot Specimens

Sylvie Faucher, Alexandre Martel, Alice Sherring,et al.Clinical Chemistry, 2004, 50(7): 1250- 1253

目的：以蛋白微珠阵列（protein bead array，PBA）技术为基础，建立一种能够从新鲜血浆和干血斑标本中快速、并行检测7种HIV-1病毒蛋白抗体的高通量检测方法，并对这种方法进行临床评价。

方法：将7种来自HIV-1病毒基因组gag、pol及衣壳区基因序列的重组蛋白与BSA（质控抗原）分别与Luminex公司提供的经不同荧光编码的微球进行共价交联，然后加入稀释后的血浆和干血斑标本内，在96孔微孔滤膜板内孵育1h，再加入生物素交联的抗人IgG抗体和链亲和素化的报告荧光分子藻红蛋白（SA-PE），反应完成后用Luminex 100系统分析结果。

结果：完成整个HIV-1蛋白微珠阵列反应测试仅需3小时。通过13次连续测试得到的7个项目结果间的重复性（CV）均为3-10%。和购自Bio-Rad公司、Adaltis公司的商品化EIA试剂盒以及购自Calypte Biomedical公司的Western blot试剂的对比实验表明：HIV-1 PBA方法和2种商品化EIA试剂盒测得的结果一致，而比WB方法的灵敏度要高

结论：本研究建立了HIV-1病毒抗体的PBA检测方法，对比试验表明PBA方法与传统的EIA方法的检测结果一致，而灵敏度、重复性、操作的简便性优于WB。PBA方法组合灵活，可以方便地加入更多其它HIV-1/2或不同HIV-1病毒亚型的蛋白，且具有高通量的特点，既可用于广谱的血清学筛查，又能用于确诊试验或疫苗的免疫效果研究，在HIV感染的检测中具有重要的应用价值。