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流式荧光技术(液芯)在人乳头瘤病毒(HPV)基因分型中的应用
发布时间2007年6月13日11时23分
 

  

Facile, Comprehensive, High-Throughput Genotyping of Human Genital Papillomaviruses Using Spectrally Addressable Liquid Bead Microarrays

Jan Wallace, Bruce A. Woda, German Pihan.Journal of Molecular Diagnostics, 2005,7(1):72-80

 

目的:人乳头瘤病毒(HPV)亚型众多,其中大约有40多种能引起生殖道感染,不同亚型的感染对生殖道的致病能力是不同的,本文旨在研究一种高通量、快速、一次检测就能筛查45HPV亚型的液态芯片检测方法。

方法:利用通用引物PGMY09/11扩增出45HPV亚型的片段,然后在此扩增的片段序列上设计出针对不同亚型的特异性探针并共价交联在不同的编码微球上。检测时,标本DNA经扩增后,与微球杂交,最后上Luminex 100仪器上分析。

结果:针对429个经过子宫颈抹片检查的标本(110,LIS;202,ASCUS;117,正常),72.2%是LIS,51.5SASCUS,15.4%正常,与琼脂糖电泳检测相比,阳性标本数分别是202206,阴性标本检测数分别是227223,两种方法基本一致。但在和HC Ⅱ的检测比较中发现HC Ⅱ的假阳性率达到17%,而且其在高危、低危亚型间容易发生交叉反应。

结论:相比目前的Southern杂交结合RFLP分析法、点杂交、线性杂交、ELISA以及固态芯片等方法,HPV液芯分型检测方法具有准确性高、检测时间快、高通量、低成本等优点。

 
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